【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。
1.产品名称：小鼠脑动脉血管平滑肌细胞操作步骤
2.组织来源：脑动脉组织
3.产品规格：5×10^5cells/T25细胞培养瓶
4.细胞简介：
小鼠脑动脉血管平滑肌细胞分离自脑动脉组织；脑动脉有成对的颈内动脉和椎动脉互相衔接成动脉循环；静脉系多不与同名动脉拌行，所收集的静脉血*入静脉窦再汇入颈内静脉；各级静脉都没有瓣膜。它包括脑的动脉系统和脑的静脉系统。脑动脉平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。
本公司的小鼠脑动脉平滑肌细胞采用*-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10^5cells/瓶；细胞经alpha-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
5.培养基信息：
DMEM[H]、FBS、平滑肌细胞生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
冷冻保存方法一：冷冻管置于4℃300分钟→(-20℃30分钟*)→-80℃16~18小时(或隔夜)→液氮槽*储存。
冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期储存。-20℃不可超过1小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，也可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
操作步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%*培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
优势：
1、细胞株种类齐全，包括肿瘤细胞、正常细胞、耐药细胞株，如：人滑膜细胞，人胃癌细胞，人细胞，人肾近曲小管上皮细胞，肝癌细胞，心肌细胞，子宫内膜细胞等
2、*，专业的细胞培养技术指导
3、购买本公司的细胞株，免费复苏
4、客户收到细胞后一天回传细胞图片，三天回传细胞生长状态图片，五天内有问题公司负责重发，超过五天时限至一个月内重发细胞收半价，超过一个月重发全额收费。
5、经济、实惠、可靠，完善、稳定的实验体系，优秀的科研队伍，*的实验设备、准确可靠的实验结果，是您可靠的合作伙伴
6、此外，我们还可以提供Elisa试剂盒、细胞株、抗体、血清、培养基、常用生化试剂、耗材。
小鼠超敏C反应蛋白
小鼠β2糖蛋白1抗体IgA/G/M
大鼠抑制素B
人甲状腺非肽激素抗体
大鼠胰岛素受体β
小鼠T细胞活化连接蛋白
人抗类固醇生成细胞抗体
人粒细胞特异性抗核抗体
小鼠抗子宫内膜抗体
大鼠糖化血红蛋白A1c
小鼠低密度脂蛋白免疫复合物
大鼠淋巴细胞功能相关抗原3
人抗信号识别颗粒抗体
人封闭抗体
小鼠解脲脲原体抗体
大鼠可溶性血小板内皮细胞粘附分子1
人抗细胞膜DNA抗体
小鼠神经胶质纤维酸性蛋白
大鼠主要组织相容性复合体Ⅲ类
大鼠主要组织相容性复合体Ⅱ类
小鼠抗中性粒细胞核周抗体
人抗钙蛋白酶抑素抗体
兔骨成型蛋白7
小鼠磷脂酰肌醇抗体IgG/IgM
人卵清蛋白特异性IgE
人抗核仁纤维蛋白抗体
小鼠15脂加氧酶
大鼠透明质酸
人系统性红斑狼疮
大鼠胰高血糖素样肽1
小鼠β干扰素
大鼠胆囊收缩素/肠促*肽
人抗*抗体
小鼠肌钙蛋白Ⅰ
大鼠脑肠肽
人抗髓鞘相关糖蛋白抗体
小鼠血清淀粉样蛋白A
抗体IgG 0.2ml
Anti-AT2R/FITC 荧光素标记血管紧张素Ⅱ-2型受体抗体IgG 0.2ml
Anti-ATF1/FITC 荧光素标记活化复制因子1抗体IgG 0.2ml
Anti-ATR/ACTR(phospho Ser428) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化ATR抗体IgG 0.2ml
Anti-ATF2/FITC 荧光素标记活化复制因子2抗体IgG 0.2ml
Anti-phospho-ATF2(Thr69/71) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠、猴磷酸化活化复制因子2(phospho ATF 2)抗体IgG 0.2ml
Anti-ATF3/FITC 荧光素标记活化转录因子3抗体IgG 0.2ml
Anti-ATF4/FITC 荧光素标记活化转录因子4抗体IgG 0.2ml
Anti-ATF6/FITC 荧光素标记活化转录因子6抗体IgG 0.2ml
Anti-ATG1/ULK1/FITC 荧光素标记自噬相关蛋白1抗体IgG 0.2ml
Anti-ATG7/FITC 荧光素标记自噬相关蛋白7抗体IgG 0.2ml
Anti-thrombin II /FITC 荧光素标记*Ⅱ抗体IgG 0.2ml
Anti-ATH III /FITC 荧光素标记抗*Ⅲ抗体IgG 0.2ml
Anti-ATM/FITC 荧光素标记毛细血管扩张性共济失调症突变蛋白抗体IgG 0.2ml
Anti-Phospho-PAK4 (Ser99)/FITC 荧光素标记磷酸化p21激活激酶4抗体IgG 0.2ml
Anti-ATP2c1/Ca++ ATPase/FITC 荧光素标记钙离子ATP酶通道蛋白抗体IgG 0.2ml
Anti-ATP4B/H+K+ ATPase/FITC 荧光素标记氢钾ATP酶通道蛋白抗体IgG 0.2ml
Anti-ATP5j/FITC 荧光素标记ATP合成酶H+转运线粒体F0复合体亚基F6抗体IgG 0.2ml
Anti-ATP7A/FITC 荧光素标记铜转运蛋白质α链抗
