1.产品名称：大鼠角膜上皮细胞实验方法
2.组织来源：眼角膜组织
3.产品规格：5×10^5cells/T25细胞培养瓶
4.细胞简介：
大鼠角膜上皮细胞分离自眼角膜组织；角膜位于眼球前壁的一层透明膜，约占纤维膜的前1/6，从后面看角膜呈正圆形，从前面看为横椭圆形。角膜厚度各部分不尽相同，*部zui薄。角膜有十分敏感的神经末梢，如有外物接触角膜，眼睑便会不由自主地合上以保护眼睛。为了保持透明，角膜并没有血管，透过外界空气、泪液及房水获取养份及氧气。角膜分为五层，由前向后依次为：上皮细胞层、前弹力层、基质层、后弹力层、内皮细胞层。其主要功能如下：①角膜是*的无血管的组织，具有透明的特性和合成许多蛋白的功能，分三层细胞层，外层即是上皮细胞；②角膜上皮细胞能参与先天性免疫，能感应病原体存在并发出信号从而激活角膜防御系统；③角膜上皮细胞能高效表达醛脱氢酶。角膜上皮细胞的体外培养对研究角膜的生理学、病理学、免疫学以及分子生物学都是极为重要的手段，常用于研究细胞代谢产物、病毒感染、各种生长因子和药物对细胞生长的影响。
本公司的大鼠角膜上皮细胞采用*-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法，并通过上皮细胞培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10^5cells/瓶；细胞经PCK免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
5.培养基信息：
M199、FBS、上皮细胞生长添加剂、Hydrocortisone、Insulin、Transferrin、Epinephrine、Penicillin、Streptomycin等
优势：
1、细胞株种类齐全，包括肿瘤细胞、正常细胞、耐药细胞株，如：人滑膜细胞，人胃癌细胞，人细胞，人肾近曲小管上皮细胞，肝癌细胞，心肌细胞，子宫内膜细胞等
2、*，专业的细胞培养技术指导
3、购买本公司的细胞株，免费复苏
4、客户收到细胞后一天回传细胞图片，三天回传细胞生长状态图片，五天内有问题公司负责重发，超过五天时限至一个月内重发细胞收半价，超过一个月重发全额收费。
5、经济、实惠、可靠，完善、稳定的实验体系，优秀的科研队伍，*的实验设备、准确可靠的实验结果，是您可靠的合作伙伴
6、此外，我们还可以提供Elisa试剂盒、细胞株、抗体、血清、培养基、常用生化试剂、耗材。
操作步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%*培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
冷冻保存方法一：冷冻管置于4℃300分钟→(-20℃30分钟*)→-80℃16~18小时(或隔夜)→液氮槽*储存。
冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期储存。-20℃不可超过1小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，也可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。
(CKB) 96T Y17830 Homo sapiens (Human)
磷脂酶D(PLD)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Phospholipase D (PLD) 96T Y17831 Homo sapiens (Human)
组织金属蛋白酶抑制因子4(TIMP4)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 4 (TIMP4) 96T Y17832 Bos taurus; Bovine (Cattle)
组织金属蛋白酶抑制因子4(TIMP4)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 4 (TIMP4) 96T Y17833 Homo sapiens (Human)
组织金属蛋白酶抑制因子4(TIMP4)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 4 (TIMP4) 96T Y17834 Mus musculus (Mouse)
组织金属蛋白酶抑制因子4(TIMP4)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 4 (TIMP4) 96T Y17835 Sus scrofa; Porcine (Pig)
组织金属蛋白酶抑制因子4(TIMP4)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 4 (TIMP4) 96T Y17836 Rattus norvegicus (Rat)
组织金属蛋白酶抑制因子4(TIMP4)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 4 (TIMP4) 96T Y17837 Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
赖氨酰氧化酶(LOX)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Lysyl Oxidase (LOX) 96T Y17838 Rattus norvegicus (Rat)
组织转*酶(TGM2)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Transglutaminase 2, Tissue (TGM2) 96T Y17839 Homo sapiens (Human)
RAS癌基因家族成员RAB5A(RAB5A)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for RAB5A, Member RAS Oncogene Family (RAB5A) 96T Y17840 Homo sapiens (Human)
锌结合α2-糖蛋白1(αZGP1)检测试剂盒(化学发光免
0.2ml
Anti-TNF- Beta/FITC 荧光素标记肿瘤坏死因子-β抗体IgG 0.2ml
Anti-TNFAIP1/FITC 荧光素标记肿瘤坏死因子α诱导蛋白1抗体IgG 0.2ml
Anti-TNFAIP3 /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠肿瘤坏死因子α诱导蛋白3抗体IgG 0.2ml
Anti-TNFSF14/LIGHT/CD258/FITC 荧光素标记肿瘤坏死因子配体超家族成员14抗体IgG 0.2ml
Anti-TNFSF4/CD252/FITC 荧光素标记肿瘤坏死因子配体超家族成员4抗体IgG 0.2ml
Anti-TNFSF18/GITR Ligand/FITC 荧光素标记肿瘤坏死因子配体超家族成员18抗体IgG 0.2ml
Anti-TNF- Alpha /HRP 辣根过氧化物酶标记肿瘤坏死因子抗体IgG 0.2ml
Anti-TNF- Alpha /HRP 辣根过氧化物酶标记鼠抗人肿瘤坏死因子-α单克隆抗体IgG 0.2ml
Anti-CD34/Biotin *标记CD34抗体IgG 0.2ml
Anti-TOPO II Alpha/DNA TP II Alpha /FITC 荧光素标记DNA拓普西异构酶Ⅱ抗体IgG 0.2ml
Anti-TNF- Alpha /RBITC 红色荧光素标记肿瘤坏死因子抗体 0.2ml
Anti-TP53/FITC 荧光素标记抗肿瘤P53抗体IgG 0.2ml
Anti-t-PA/FITC 荧光素标记组织型纤溶酶原激活剂抗体IgG 0.2ml
Anti-TPH /FITC 荧光素标记*羟化酶抗体IgG 0.2ml
Anti-TPO/FITC 荧光素标记兔抗甲状腺过氧化物酶抗体IgG 0.2ml
Anti-TRA16/FITC 荧光素标记激素受体相关蛋白16抗体IgG 0.2ml
Anti-TRA16 /FITC 荧光素标记激素受体相关蛋白/孤儿素受体相关蛋白抗体IgG 0.2ml
Anti-TRADD/FITC 荧光素标记有死亡区的肿瘤坏死因子受体1相关蛋白抗体IgG 0.2ml
Anti-TP I /FITC 荧光素标记拓普西异构酶Ⅰ抗体IgG 0.2ml
Anti-TRAF1/Biotin *化肿瘤坏死因子受体相关因子1抗体 0.2ml
