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链霉菌 PCR Mix 6100 次实验步骤

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所  在  地上海市

更新时间:2017-01-19 16:39:34浏览次数:389次

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产品简介

链霉菌 PCR Mix 6100 次实验步骤运输及保存 低温运输,-20℃保存,有效期一年。

详细介绍

链霉菌 PCR Mix 6100 次实验步骤产品及特点:
本试剂盒提供合成 cDNA *链所需要的全部试剂。其原理是用突变的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反转录酶(M-MuLV RT)高效合成 mRNA 的全长 cDNA 拷贝。
1. 使用突变的反转录酶,内源 RNase H 活性低。
2. zui长可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、随机引物和 RNA 专一性引物三种引物(前两种本试剂盒提 供)。
4. 总 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作为模板。
5. 可用于 cDNA 文库构建、RT-PCR、探针标记等。
链霉菌 PCR Mix 6100 次实验步骤合成建文库用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反应体系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或专一的 RNA 0.5-1 ug
注意:RNA 样品不能含有基因组 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板专一性引物 100 pmol 注意:随机引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均长度成反比。 RNase-free 水 补水到 13 uL 2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含 dNTP)。
4. 37℃保温 5 分钟。对富含二级结构的高 GC RNA 模板,可以改成 45℃保 温 5 分钟。如果使用随机引物,则改成 25℃ 5 分钟)。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶(含 RI),反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟(但如果使用随机引物,需要先 25℃保温 10 分钟,然 后再转移到 42℃保温 60 分钟)。此步为 RT 反应。
7. 70℃保温 10 分钟以终止反应,放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二链 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反应体系:
对照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或对照引物 2 uL
RNase-free 水 补水到 13 uL
2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含标记 dNTP,本试剂不提供)。
4. 37℃保温 5 分钟。如果使用随机引物,则保温温度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶(含 RI),反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟(但如果使用随机引物,需要先 25℃保温 10 分钟,然后再转移到 42℃保温 60 分钟)。
7. 加 1uL 0.5M EDTA,放置在冰上待用。
8. 电泳检测。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 总量的 50%以上,电泳一般能出现 1.1Kb 的片段(如果使用随机引物,将出现多个小片段)。

〖CAS号〗:5486-84-0 
C17H18N3O3Cl ? 1/2ZnCl2=415.94 
〖级别〗:For microscopy
有效分光〖含量〗:≥35.0%
〖含量〗(以Zn计):≥7.5%
吸光度试验:合格
薄层层析试验:合格
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗:浅米红色或黄绿色粉末,对光敏感,〖熔点〗 157℃(分解)。zui大吸收波长 395nm
〖用途〗:本品仅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗仅供参考)测定脂酶及碱性磷酸酶。用于显微镜
〖保存〗:-20℃,避光
固蓝RR盐
〖英文名称〗:Fast blue RR salt;Azoicdiazo No.24;Diazonium salt of 4-benzoyl amino-2,5-dimethoxyaniline;4-Benzoylamino-2,5-dimethoxybenzene diazonium chloride hemi[zinc chloride]salt;4-Amino-2,5-dimethoxybenzanilide diazotated zinc double salt  
〖其他名称〗:重氮坚牢蓝;坚牢蓝RR盐;重氮固蓝RR;4-苯甲酰氨基-2,5-二甲氧基氯化重氮苯氯化〖锌〗盐;耐晒兰RR盐
〖CAS号〗:14726-29-5 
C15H14ClN3O3?1/2ZnCl2=387.89 
〖级别〗:BR 

GAPDH 小鼠单抗    细菌 RNAout
植物 Actin 小鼠单抗    细菌蛋白酶抑制剂
植物 Actin 小鼠单抗    细菌膜蛋白质微量提取试剂盒
组蛋白 3.1 小鼠单抗    细菌总蛋白质微量提取试剂盒
组蛋白 3.1 小鼠单抗    虾碱性磷酸酶
COX IV 兔单抗    *
小鼠抗 His 标签单抗    *溶液 ,100mg/mL
小鼠抗 His 标签单抗    纤连蛋白 ( 人血 )
小鼠抗 Flag 标签单抗    纤维蛋白原
小鼠抗 Flag 标签单抗    纤维二糖
小鼠抗 c-Myc 标签单抗    纤维素 DE-52
小鼠抗 c-Myc 标签单抗    纤维素酶
小鼠抗 HA 标签单抗    显影定影套装
小鼠抗 HA 标签单抗    显影粉
小鼠抗 GST 标签单抗    线状 DNA 清除剂
小鼠抗 GST 标签单抗    腺苷
小鼠抗 V5 标签单抗    腺苷脱氨酶
    小鼠 R


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