高 GC 革氏阳性细菌 PCR Mix 5100 次原理合成建文库用的 1st-strand cDNA:
1. 按下表配制 RT 反应体系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或专一的 RNA 0.5-1 ug
注意：RNA 样品不能含有基因组 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板专一性引物 100 pmol 注意：随机引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均长度成反比。 RNase-free 水 补水到 13 uL 2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含 dNTP）。
4. 37℃保温 5 分钟。对富含二级结构的高 GC RNA 模板，可以改成 45℃保 温 5 分钟。如果使用随机引物，则改成 25℃ 5 分钟）。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶（含 RI），反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟（但如果使用随机引物，需要先 25℃保温 10 分钟，然 后再转移到 42℃保温 60 分钟）。此步为 RT 反应。
7. 70℃保温 10 分钟以终止反应，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二链 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
高 GC 革氏阳性细菌 PCR Mix 5100 次原理按下表配制 RT 反应体系:
对照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或对照引物 2 uL
RNase-free 水 补水到 13 uL
2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含标记 dNTP，本试剂不提供）。
4. 37℃保温 5 分钟。如果使用随机引物，则保温温度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶（含 RI），反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟（但如果使用随机引物，需要先 25℃保温 10 分钟，然后再转移到 42℃保温 60 分钟）。
7. 加 1uL 0.5M EDTA，放置在冰上待用。
8. 电泳检测。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 总量的 50%以上，电泳一般能出现 1.1Kb 的片段（如果使用随机引物，将出现多个小片段）。
产品及特点:
本试剂盒提供合成 cDNA *链所需要的全部试剂。其原理是用突变的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反转录酶（M-MuLV RT）高效合成 mRNA 的全长 cDNA 拷贝。
1. 使用突变的反转录酶，内源 RNase H 活性低。
2. zui长可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、随机引物和 RNA 专一性引物三种引物（前两种本试剂盒提 供）。
4. 总 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作为模板。
5. 可用于 cDNA 文库构建、RT-PCR、探针标记等。
水中溶解性试验：合格
层析试验：合格
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗：黄色或橄榄绿色粉末，溶于水。商品常为较稳定的氯化〖锌〗复盐
〖用途〗：本品仅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗仅供参考)生物染色剂，组织化学研究用
〖保存〗：-20℃，避光
氨基10B
〖英文名称〗：Amino black 10B；Buffalo black NBR；Acid black 1
〖其他名称〗：萘酚蓝；水牛NBR；酸性1；苯胺蓝；酸性10B；酸性蓝10B；酸性青光蓝10B；4-氨基-5-羟基-3-(对硝基苯偶氮)-6-(苯偶氮)-2,7-萘二磺酸二钠盐；萘蓝；对硝基苯偶氮-3,6-二磺酸-1-氨基-8-萘酚-7-偶氮苯钠盐
〖CAS号〗：1064-48-8
C22H14N6Na2O9S2=616.49
〖级别〗：AR
〖含量〗：≥80%
Lambda Max(nm)：616～620
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗：蓝色或褐色粉末。溶于水(呈蓝色)、乙醇(呈深蓝色)和溶纤剂(二乙醇一乙迷)，微溶于丙同，不溶于其他有机溶剂。遇浓硫酸显蓝绿色，经稀释成深绿蓝色沉淀。遇浓硝酸显深绿色溶液。与10%氢氧溶液显红色荧光的蓝色溶液。水溶液加入浓盐酸生成绿蓝色沉淀，加入浓氢氧溶液成蓝色沉淀。染色时，遇铜；〖铁〗离子，其色泽前者微有变化，后者略带浅绿
〖用途〗：本品仅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗仅供参考)电泳试剂，用于对聚丙烯酰胺凝胶、琼脂糖凝胶和硝酸纤维素膜上蛋白质的染色。在电泳后，*固定蛋白质在胶上。胶用 0.1% 氨基10B的7% (v/v) 醋酸溶液染至少2 小时，然后用7% (v/v) 醋酸溶液脱色。检测灵敏度大概是考马斯亮蓝R250的20%。氧化还原指示剂
〖保存〗：RT
小鼠抗 V5 标签单抗 腺嘌呤
小鼠抗 MBP 标签单抗 腺嘌呤硫酸盐
小鼠抗 MBP 标签单抗 消解酶 ( 溶细胞酶 ) 干粉
小鼠抗 GFP 标签单抗 硝苯吡啶
小鼠抗 GFP 标签单抗 硝酸纤维素膜，13×20cm
小鼠抗 mCherry 标签单抗 硝酸纤维素膜，13×20cm
小鼠抗 mCherry 标签单抗 *
小鼠 RFP 标签单抗 小 RNA 克隆试剂盒
小鼠 RFP 标签单抗 小胶质细胞生长因子
小鼠抗 VSV-G 标签单抗 小牛胸腺 DNA
小鼠抗 T7 标签单抗 小牛胸腺 DNA 溶液
小鼠抗 T7 标签单抗 小鼠 NK 细胞分离液 1.076
小鼠抗 CBP 标签单抗 小鼠 RFP 标签单抗
小鼠抗 HSV 标签单抗
