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草杆菌 PCR Mix 4100 次实验方法

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更新时间:2017-01-19 16:38:20浏览次数:342次

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产品简介

草杆菌 PCR Mix 4100 次实验方法运输及保存 低温运输,-20℃保存,有效期一年。

详细介绍

草杆菌 PCR Mix 4100 次实验方法产品及特点:

本试剂盒提供合成 cDNA *链所需要的全部试剂。其原理是用突变的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反转录酶(M-MuLV RT)高效合成 mRNA 的全长 cDNA 拷贝。
1. 使用突变的反转录酶,内源 RNase H 活性低。
2. zui长可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、随机引物和 RNA 专一性引物三种引物(前两种本试剂盒提 供)。
4. 总 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作为模板。
5. 可用于 cDNA 文库构建、RT-PCR、探针标记等。

草杆菌 PCR Mix 4100 次实验方法合成建文库用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反应体系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或专一的 RNA 0.5-1 ug
注意:RNA 样品不能含有基因组 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板专一性引物 100 pmol 注意:随机引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均长度成反比。 RNase-free 水 补水到 13 uL 2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含 dNTP)。
4. 37℃保温 5 分钟。对富含二级结构的高 GC RNA 模板,可以改成 45℃保 温 5 分钟。如果使用随机引物,则改成 25℃ 5 分钟)。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶(含 RI),反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟(但如果使用随机引物,需要先 25℃保温 10 分钟,然 后再转移到 42℃保温 60 分钟)。此步为 RT 反应。
7. 70℃保温 10 分钟以终止反应,放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二链 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反应体系:
对照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或对照引物 2 uL
RNase-free 水 补水到 13 uL
2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含标记 dNTP,本试剂不提供)。
4. 37℃保温 5 分钟。如果使用随机引物,则保温温度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶(含 RI),反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟(但如果使用随机引物,需要先 25℃保温 10 分钟,然后再转移到 42℃保温 60 分钟)。
7. 加 1uL 0.5M EDTA,放置在冰上待用。
8. 电泳检测。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 总量的 50%以上,电泳一般能出现 1.1Kb 的片段(如果使用随机引物,将出现多个小片段)。

苏丹Ⅳ
〖英文名称〗:Sudan Ⅳ;Sudan red BB;Scarlet red;Solvent red 24;Oil red Ⅳ;Biebrich scarlet Rfat solube;Fat ponceau;o-Tolylazo-tolylazo-β-naphthol ;C.I. 26105 
〖其他名称〗:苏旦IV;四号苏丹红;猩红;邻甲苯偶氮邻甲苯偶氮-3-萘酚;油溶暗红;溶剂红24;苏丹红B ;1-[4-(邻甲苯偶氮)邻甲苯偶氮]-2-萘酚;1-(2-甲基-4-(2-甲基苯基偶氮)苯基偶氮)-2-萘酚;邻甲苯偶氮邻甲苯偶氮-2-萘酚;油溶红;烛红
〖CAS号〗:85-83-6 
C24H20N4O=380.45
〖级别〗:BS
生物染色试验:合格
〖熔点〗:186~192℃
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗:深棕色粉末。无气味。在175℃时软化结块,在181~188℃熔融分解,260℃全部分解。1g溶于15ml氯方,易溶于苯,溶于油、脂肪、石蜡油、*,微溶于乙醇和丙同,几乎不溶于水。在醇或苯中呈微紫红色溶液,醇溶液遇氢氧显红紫色,硫酸中显蓝绿色,稀释则生成红色沉淀
〖用途〗:本品仅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗仅供参考)油和脂肪染色,苏丹Ⅳ可以用油红O代替,高温温度计用色
〖保存〗:RT
苏丹Ⅲ
〖英文名称〗:Sudan Ⅲ;Fat ponceau G;Sudan red;Cerasin red;Oil red;Solvent red 23;Tony red;Tetraazobenzene-β-naphthol, 1-(p-Phenylazophenylazo)-2-naphthol;Sudan red BK  
〖其他名称〗:三号苏丹红;黄光油溶红;油红;苯基偶氮(4-偶氮-1)-2-萘酚;苏旦Ⅲ;苏丹红Ⅲ;1-[4-(苯基偶氮)苯基偶氮]-2-萘酚;溶剂红23;苯偶氮苯偶氮-2-萘酚;透明红HRR 
〖CAS号〗:85-86-9 
C22H16N4O=352.39
〖级别〗:BS 
生物染色试验:合格 
吸收光谱试验:合格
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗:红棕色粉末。易溶于苯,溶于氯方、冰乙酸、乙迷、乙醇、丙同、石油醚、不挥发油、热甘油和挥发油,不溶于水。〖熔点〗 195℃。zui大吸收波长 507(354)nm。

小鼠抗 E2 标签单抗    小鼠白细胞分离液 1.093
小鼠抗 S1 标签单抗    小鼠单核细胞分离液 1.090
小鼠抗 Tag-100 标签蛋白单抗    小鼠基因组 DNA
小鼠抗 HPC4 标签蛋白单抗    小鼠抗 CBP 标签单抗
小鼠抗 SUMO 标签蛋白单抗    小鼠抗 c-Myc 标签单抗
小鼠抗 SUMO 标签蛋白单抗    小鼠抗 c-Myc 标签单抗
HRP 标记内参抗体 (β-actin)    小鼠抗 E2 标签单抗
HRP 标记内参抗体 (GAPDH)    小鼠抗 Flag 标签单抗
HRP 标记内参抗体 (β-Tubulin)    小鼠抗 Flag 标签单抗
双荧光素酶报告基因检测试剂盒    小鼠抗 GFP 标签单抗
荧光染色细胞凋亡检测试剂盒    小鼠抗 GFP 标签单抗
离液 1.128


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