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石蜡包埋组织全基因组扩增试剂盒30 次实验方法

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更新时间:2017-01-19 15:19:39浏览次数:276次

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产品简介

石蜡包埋组织全基因组扩增试剂盒30 次实验方法运输及保存 低温运输,-20℃保存,有效期一年。

详细介绍

石蜡包埋组织全基因组扩增试剂盒30 次实验方法产品及特点:
本试剂盒提供合成 cDNA *链所需要的全部试剂。其原理是用突变的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反转录酶(M-MuLV RT)高效合成 mRNA 的全长 cDNA 拷贝。
1. 使用突变的反转录酶,内源 RNase H 活性低。
2. zui长可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、随机引物和 RNA 专一性引物三种引物(前两种本试剂盒提 供)。
4. 总 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作为模板。
5. 可用于 cDNA 文库构建、RT-PCR、探针标记等。
石蜡包埋组织全基因组扩增试剂盒30 次实验方法产品介绍:

合成建文库用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反应体系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或专一的 RNA 0.5-1 ug
注意:RNA 样品不能含有基因组 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板专一性引物 100 pmol 注意:随机引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均长度成反比。 RNase-free 水 补水到 13 uL 2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含 dNTP)。
4. 37℃保温 5 分钟。对富含二级结构的高 GC RNA 模板,可以改成 45℃保 温 5 分钟。如果使用随机引物,则改成 25℃ 5 分钟)。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶(含 RI),反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟(但如果使用随机引物,需要先 25℃保温 10 分钟,然 后再转移到 42℃保温 60 分钟)。此步为 RT 反应。
7. 70℃保温 10 分钟以终止反应,放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二链 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反应体系:
对照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或对照引物 2 uL
RNase-free 水 补水到 13 uL
2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含标记 dNTP,本试剂不提供)。
4. 37℃保温 5 分钟。如果使用随机引物,则保温温度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶(含 RI),反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟(但如果使用随机引物,需要先 25℃保温 10 分钟,然后再转移到 42℃保温 60 分钟)。
7. 加 1uL 0.5M EDTA,放置在冰上待用。
8. 电泳检测。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 总量的 50%以上,电泳一般能出现 1.1Kb 的片段(如果使用随机引物,将出现多个小片段)。

〖英文名称〗:TBAHS;IPC-TBA-HS;Tetrabutylammoniumhydrogen sulfate
〖其他名称〗:硫酸氢四丁铵;四丁基硫氢酸铵;正四丁基硫酸氢基铵;四丁基酒石酸氢铵;硫酸氢化四丁基
〖CAS号〗:32503-27-8
C16H37NSO4=339.53
〖级别〗:Chromatography grade
〖含量〗:≥99.0%
〖熔点〗:167~172℃
〖干燥失重〗:≤0.4%
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗:白色半透明结晶。易吸湿。〖熔点〗 169~171℃。有刺激性。
〖用途〗:本品仅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗仅供参考)离子对色谱试剂。相转移催化剂。
〖保存〗:RT
4,4-双(二甲氨基)硫代二苯甲酮
〖英文名称〗:Thiomichler's ketone;4,4′-Bis(dimethylamino)thiobenzophenone;4,4′-Tetramethyldiaminothiobenzophenone;p,p′-Tetramethyldiaminoth- iobenzophenone
〖其他名称〗:4,4-双(二甲氨基)硫代二甲酮;硫代米氏酮;4,4′-四甲基二氨基硫代二苯甲酮;对,对′-四甲基二氨基二苯硫酮;4,4′-双(二甲氨基)硫代二苯甲酮;4,4'-双二甲氨基硫代二苯甲酮;硫代米蚩酮;双[4-(二甲氨基)苯基]甲硫酮;4,4'-双(二甲胺基)硫代苯甲酮
〖CAS号〗:1226-46-6
C17H20N2S=284.42
〖级别〗:AR
〖熔点〗:201~206℃
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗:深红色结晶。易溶于热乙醇、苯和乙酸,溶于盐酸中呈深蓝色,溶于氯方中呈深红色,不溶于石油醚和水。
〖用途〗:本品仅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗仅供参考)测定金、钯、铂、汞、银、铜的光度试剂。

Pyrrolidinedithioca rbamin acid.ammonium salt(NF-kB 抑制剂 / 抗氧化剂 )    C600 菌种
Rapamycin(FRAP/mTOR 抑制剂 )    DB3.1 菌种
SB203580(p38MAPK 抑制剂 )    DH5αλpir 菌种
Simvastatin(HMG-CoA Reductase 抑制剂 )    ER2566 菌种
S-Methyl-ITU.sulfate(iN0S 抑制剂 )    ER2529 菌种
SMT(iNOS 抑制剂 )    ER2738 菌种
SNP(NO 供体 )    JF1125 菌种
SOD( 抗氧化酶 )    JM101 菌种
Sodium Butyrate(HDAC 抑制剂 )    JM103 菌种
Sodium orthovanadate( 磷酸酯酶抑制剂 )    JM105 菌种
cDNA 合成试剂盒


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