【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称 人肺腺癌细胞；SPC-A1培养
形态特性 上皮细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 STR检测发现该细胞可能被HeLa细胞污染。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
传代方法
传代情况 C2
冻存条件 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法（-）
STR Amelogenin：X；CSF1PO：9，10；D13S317：12，13.3；D16S539：9，10；D18S51：16；D19S433：13，14；D21S11：27，28；D2S1338：17；D3S1358：15，18；D5S818：11，12；D7S820：8，12；D8S1179：12；FGA：21；TH01：7；TPOX：8，12；vWA：16，18；
同工酶
染色体
使用权限 A类
复苏操作要点：
1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过zui易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
操作步骤：
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片，待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室温孵育爬片20min，使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min（一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢），PBS冲洗3次，每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min，PBS冲洗3次，每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育：按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗，滴加在爬片上，于4°C湿盒中孵育一夜，PBS冲洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：选与一抗对应的二抗，按比例稀释后滴加在爬片上，37°C湿盒中孵育30min，PBS冲洗3次，每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干，爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染：用Harris苏木素复染30s~1min，水洗后用1%的盐酸酒精分化，再用蒸馏水（或PBS）水洗返蓝。
10. 封片：将中性树胶滴在爬片一侧，再用盖玻片盖上，先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
4-嘧啶酮 CAS号： 4562-27-0 说明书
3-氨基-4-溴苯甲酸甲酯 CAS号： 46064-79-3 报价
3-羟甲基哌啶 CAS号： 4606-65-9 进口、国产
1,4-苯二硼酸 CAS号： 4612-26-4 现货供应
6-氮杂脲嘧啶 CAS号： 461-89-2 说明书
5-氟-邻二甲苯 CAS号： 461-97-2 报价
3-氟丙醇 CAS号： 462-43-1 进口、国产
二乙氧基甲烷 CAS号： 462-95-3 现货供应人基质金属蛋白酶5(MMP-5)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人基质金属蛋白酶4(MMP-4)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人基质金属蛋白酶3(MMP-3)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人基质金属蛋白酶2/明胶酶A(MMP-2/Gelatinase A)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人基质金属蛋白酶13(MMP-13)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人基质金属蛋白酶12（MMP-12）ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人基质金属蛋白酶11(MMP11)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人基质金属蛋白酶10(MMP-10)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人基质金属蛋白酶1(MMP-1)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
