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人肝癌细胞;Hep3b特性

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所  在  地上海

更新时间:2017-01-20 22:41:52浏览次数:163次

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产品简介

人肝癌细胞;Hep3b特性,质量有保证、*、实验效果好,同时我司为您提供价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明,欢迎前来选购!

详细介绍

产品名称生长特性发货地货期
人肝癌细胞;Hep3b特性贴壁生长上海3-5天

细胞名称  人肝癌细胞;Hep3b特性
形态特性   上皮细胞样
生长特性  贴壁生长
特征特性   Hep-3b细胞建系于1979年,源自一位患有肝癌的7岁黑人男童。该细胞产生甲胎蛋白(alpha-fetoprotein)、乙肝表面抗原(BHsAg) 、白蛋白、巨球蛋白、α- 抗*(alphal-antitrypsin)、转铁蛋白、补体(C3)、C3活性载体,纤维原等,具有广泛的研究价值。 
培养条件   MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
传代方法   1:4~1:6传代,每周换液2次
传代情况  C2
冻存条件   基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测  培养法(-)
STR   Amelogenin:X;CSF1PO:8;D13S317:12,14;D16S539:10;D18S51:20;D19S433:12.2,14;D21S11:30,31;D2S1338:21,25;D3S1358:15,OL;D5S818:13;D7S820:8,10;D8S1179:12;FGA:18;TH01:6,7;TPOX:9;vWA:17;
同工酶  
染色体   60~82
使用权限  A类

来源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,贴壁性好。我们从试剂、包被器皿、冻存原代细胞、新鲜原代细胞、原代细胞的分子学实验等提供全程服务。我司拥有专业的实验室,可无菌操作并提供相关科研项目解决方案以及实验服务。
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量*,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量*,使*的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去*,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止*作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
人聚集蛋白(Agrin)ELISA 试剂盒    96T/48T    试剂盒    组装/原装
人巨细胞病毒(CMV)ELISA试剂盒    96T/48T    试剂盒    组装/原装
人巨噬细胞移动抑制因子(MIF)ELISA 试剂盒    96T/48T    试剂盒    组装/原装
人巨噬细胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA 试剂盒    96T/48T    试剂盒    组装/原装
人巨噬细胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA 试剂盒    96T/48T    试剂盒    组装/原装
人巨噬细胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)ELISA 试剂盒    96T/48T    试剂盒    组装/原装
人巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2/CXCL-2)ELISA 试剂盒    96T/48T    试剂盒    组装/原装
人巨噬细胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA 试剂盒    96T/48T    试剂盒    组装/原装
人巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA 试剂盒    96T/48T    试剂盒    组装/原装
人巨噬细胞替代激活相关化学因子1(AmAC-1)ELISA 试剂盒    96T/48T    试剂盒    组装/原装
人巨噬细胞趋化因子(MCF)ELISA 试剂盒    96T/48T    试剂盒    组装/原装6-溴正己醇    CAS号:    4286-55-9    报价
3-溴-4-甲基苯甲腈    CAS号:    42872-74-2    进口、国产
2-氨基-4-甲氧基苯甲酸    CAS号:    4294-95-5    现货供应
2,3-二氢-1H-喹啉-4-酮    CAS号:    4295-36-7    说明书
2-乙炔噻吩    CAS号:    4298-52-6    报价
乙炔基溴化镁    CAS号:    4301-14-8    进口、国产
3-溴-1,1,1-三氟丙酮    CAS号:    431-35-6    现货供应
三(4-溴苯)胺    CAS号:    4316-58-9    说明书
4,6-二氯-5-硝基嘧啶    CAS号:    4316-93-2    报价
N-甲基高    CAS号:    4318-37-0    进口、国产

 

 

 


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