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人胰腺癌细胞;HS 766T复苏

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所  在  地上海市

更新时间:2017-01-20 22:39:18浏览次数:206次

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产品简介

人胰腺癌细胞;HS 766T复苏现货供应,质量有保证、*、实验效果好,同时我司为您提供价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明,欢迎前来选购!

详细介绍

人胰腺癌细胞;HS 766T复苏来源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,贴壁性好。我们从试剂、包被器皿、冻存原代细胞、新鲜原代细胞、原代细胞的分子学实验等提供全程服务。我司拥有专业的实验室,可无菌操作并提供相关科研项目解决方案以及实验服务。

细胞名称  人胰腺癌细胞;HS 766T复苏
形态特性   上皮细胞样
生长特性  贴壁生长
特征特性   该细胞1973年由 R. Owens等建系,源自62岁白人男性的胰腺癌的转移淋巴结。 
培养条件   DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS
传代方法   1:2~1:8传代,每周换液2~3次
传代情况  C4
冻存条件   基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测  培养法(-)
STR   Amelogenin:X;CSF1PO:12;D13S317:8,11;D16S539:9,12;D18S51:13;D19S433:15;D21S11:28;D2S1338:18,26;D3S1358:16;D5S818:11;D7S820:10;D8S1179:12,14;FGA:19,20;TH01:6,9.3;TPOX:8;vWA:18;
同工酶  
染色体   60,无Y染色体
使用权限  A类

产品名称生长特性发货地货期
贴壁生长上海3-5天

细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量*,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量*,使*的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去*,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止*作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
人抗α-胞衬蛋白抗体IgG/IgA(α-Fodrin IgG/IgA)ELISA 试剂盒    96T/48T    试剂盒    组装/原装
人抗SS-B/La抗体ELISA 试剂盒    96T/48T    试剂盒    组装/原装
人抗SS-A/Ro抗体ELISA 试剂盒    96T/48T    试剂盒    组装/原装
人抗sp100抗体(sp100)ELISA 试剂盒    96T/48T    试剂盒    组装/原装
人抗Sc1-70抗体(Sc1-70-Ab)ELISA 试剂盒    96T/48T    试剂盒    组装/原装
人抗Sa抗体(anti-Sa-Ab)ELISA 试剂盒    96T/48T    试剂盒    组装/原装
人抗Q热抗体(anti-Q-Ab)ELISA 试剂盒    96T/48T    试剂盒    组装/原装
人抗Mi2抗体(anti-Mi2-Ab)ELISA 试剂盒    96T/48T    试剂盒    组装/原装
人抗Ku抗体(anti-Ku-Ab)ELISA 试剂盒    96T/48T    试剂盒    组装/原装
人抗IVIgG抗体ELISA 试剂盒    96T/48T    试剂盒    组装/原装
人抗IgE受体抗体ELISA 试剂盒    96T/48T    试剂盒    组装/原装苯基*基三*    CAS号:    4207-56-1    说明书
3-羟基-6-甲基-2-吡啶甲醇    CAS号:    42097-42-7    报价
5-氯-2-吡啶醇    CAS号:    4214-79-3    进口、国产
2-氨基-4-氰基吡啶    CAS号:    42182-27-4    现货供应
醋酸铑    CAS号:    42204-14-8    说明书
1H,1H-五氟丙醇    CAS号:    422-05-9    报价
2-(溴甲基)丙烯酸甲酯    CAS号:    4224-69-5    进口、国产
6-溴己酸    CAS号:    4224-70-8    现货供应
五氟丙醛水合物, TECH    CAS号:    422-63-9    说明书
五氟丙酸    CAS号:    422-64-0    报价

 

  


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