【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称 人卵巢透明细胞癌细胞；ES-2培养
形态特性 成纤维细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞源自一位47岁患有卵巢透明细胞癌的黑人女性的*肿瘤标本，低表达P糖蛋白。
培养条件 McCoy's 5A Media (Modified with Tricine) 10%FBS
传代方法 1:4～1:8传代，每周换液2～3次
传代情况 P70
冻存条件 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法（-）
STR Amelogenin：X；CSF1PO：12；D13S317：10，12；D16S539：12；D18S51：13，14；D19S433：14，16；D21S11：27，29；D2S1338：17，20；D3S1358：16；D5S818：12；D7S820：9，11；D8S1179：12，13；FGA：22，25；TH01：6，9.3；TPOX：8，11；vWA：14，15；
同工酶
染色体 66～88，XX
使用权限 A类
复苏操作要点：
1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过zui易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
操作步骤：
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片，待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室温孵育爬片20min，使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min（一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢），PBS冲洗3次，每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min，PBS冲洗3次，每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育：按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗，滴加在爬片上，于4°C湿盒中孵育一夜，PBS冲洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：选与一抗对应的二抗，按比例稀释后滴加在爬片上，37°C湿盒中孵育30min，PBS冲洗3次，每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干，爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染：用Harris苏木素复染30s~1min，水洗后用1%的盐酸酒精分化，再用蒸馏水（或PBS）水洗返蓝。
10. 封片：将中性树胶滴在爬片一侧，再用盖玻片盖上，先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
4-溴-2-氟联苯 CAS号： 41604-19-7 说明书
5,6-二氯* CAS号： 41667-95-2 报价
1-甲基-4-咪唑甲酸 CAS号： 41716-18-1 进口、国产
2-溴-5-甲基噻唑 CAS号： 41731-23-1 现货供应
4-溴苯乙酸甲酯 CAS号： 41841-16-1 说明书
4-溴-2-氟-5-甲基苯胺 CAS号： 418762-26-2 报价
3,5-二甲基-4-羟基苯甲腈 CAS号： 4198-90-7 进口、国产
2-哌啶甲酸甲酯 CAS号： 41994-45-0 现货供应
环硫乙烷 CAS号： 420-12-2 说明书
2-氯-4-碘苯胺 CAS号： 42016-93-3 报价
*酸 CAS号： 42017-89-0 进口、国产
* CAS号： 4205-91-8 现货供应人抗单链DNA抗体/变性DNA抗体(ssDNA)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人抗单核细胞抗体(AMA)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人抗促甲状腺素受体抗体(TRAb) ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人抗补体1q抗体(C1q)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人抗丙型肝炎病毒抗体(anti-HCV)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人抗表皮细胞基底膜抗体(EBMZ)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人抗斑疹伤寒抗体(anti-typhus-Ab)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人抗百日咳病毒（PT-Ab）ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人抗白蛋白抗体(AAA)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人抗α干扰素抗体(IFNα-Ab)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
