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人膀胱移行细胞癌细胞;T24使用说明书

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所  在  地上海市

更新时间:2017-01-20 21:56:46浏览次数:209次

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产品简介

人膀胱移行细胞癌细胞;T24使用说明书细胞一般2-3天更换一次培养基,这取决于细胞生长的速度。许多细胞培养实验室通常在周一,周三,周五更换培养基。

详细介绍

【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗

细胞名称  人膀胱移行细胞癌细胞;T24使用说明书
形态特性   上皮样
生长特性  贴壁生长
特征特性   该细胞源自一位81岁白人女性患者的膀胱移行细胞癌组织;来源于移行细胞癌病人的白血病和血浆对T24和相关细胞株有细胞毒性;倍增时间为19小时;含ras (H-ras)癌基因,表达肿瘤*抗原。 
培养条件   McCoy's 5A Media (Modified with Tricine)  10%FBS
传代方法   1:3~1:8传代,每周换液2~3次。
传代情况  C3
冻存条件   基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测  培养法(-)
STR   Amelogenin:X;CSF1PO:10,12;D13S317:12;D16S539:9;D18S51:16,18;D19S433:13,14;D21S11:29;D2S1338:20,23;D3S1358:16;D5S818:10,12;D7S820:10,11;D8S1179:14;FGA:17,22;TH01:6;TPOX:8,11;vWA:17;
同工酶  
染色体  
使用权限  A类

产品名称人膀胱移行细胞癌细胞;T24使用说明书
货期3-5天
发货地上海

复苏操作要点: 
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。 
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过zui易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。 
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。 
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。 
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。 
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
操作步骤:
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
氟氯苄    CAS号:    345-35-7    说明书
*    CAS号:    34552-83-5    报价
4,4'-二氯苯偶酰    CAS号:    3457-46-3    进口、国产
N-叔丁氧羰基-L-天冬氨酸 1-叔丁酯    CAS号:    34582-32-6    现货供应
3,6-二氯-4,5-二甲基哒嗪    CAS号:    34584-69-5    说明书
5-羟基吡嗪-2-羧酸    CAS号:    34604-60-9    报价
5-溴-1-戊醇    CAS号:    34626-51-2    进口、国产
5-羟基-1-茚酮    CAS号:    3470-49-3    现货供应
6-氨基-1,2,3,4-四氢-1-萘酮    CAS号:    3470-53-9    说明书
1-苄基-3-甲基-4-哌啶酮    CAS号:    34737-89-8    报价

人毛细血管扩张性共济失调突变基因(ATM)ELISA 试剂盒    96T/48T    试剂盒    组装/原装
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