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人高转移卵巢癌细胞;HO-8910PM使用说明书

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所  在  地上海市

更新时间:2017-01-20 21:18:34浏览次数:240次

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产品简介

人高转移卵巢癌细胞;HO-8910PM使用说明书细胞一般2-3天更换一次培养基,这取决于细胞生长的速度。许多细胞培养实验室通常在周一,周三,周五更换培养基。

详细介绍

【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗

细胞名称  人高转移卵巢癌细胞;HO-8910PM使用说明书
形态特性   上皮样
生长特性  贴壁生长
特征特性   是来源于HO-8910的高转移亚系。STR检测发现SGC7901、SMMC7721、QGY7701、QGY7703、QSG7701、Ho-8910PM、Ho-8910、BEL7402、SMMC7721等多株细胞为同一遗传背景,怀疑彼此间存在交叉污染。 
培养条件   RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
传代方法   1:3~1:4传代,2~3天1次。
传代情况  不详
冻存条件   基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测  培养法(-)
STR   Amelogenin:X;CSF1PO:10;D13S317:13.3;D16S539:9,10;D18S51:16;D19S433:13;D21S11:27,28;D2S1338:17;D3S1358:15,18;D5S818:12;D7S820:12;D8S1179:12;FGA:18,21;TH01:7;TPOX:12;vWA:16,17,18;
同工酶  
染色体  
使用权限  A类

产品名称人高转移卵巢癌细胞;HO-8910PM使用说明书
货期3-5天
发货地上海

复苏操作要点: 
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。 
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过zui易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。 
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。 
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。 
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。 
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
操作步骤:
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
4-溴吡啶-2-羧酸    CAS号:    30766-03-1    说明书
5-溴-2-吡啶羧酸    CAS号:    30766-11-1    报价
羟甲基膦酸二乙酯    CAS号:    3084-40-0    进口、国产
2-氰基-5-溴甲基吡啶    CAS号:    308846-06-2    现货供应
2-溴-9-芴酮    CAS号:    3096-56-8    说明书
N-叔丁氧羰基-2-甲基*    CAS号:    30992-29-1    报价
3-氯甲基吡啶    CAS号:    3099-31-8    进口、国产
(R)-3-Boc-氨基哌啶    CAS号:    309956-78-3    现货供应
L-2-哌啶酸    CAS号:    3105-95-1    说明书
3,5-吡唑二甲酸    CAS号:    3112-31-0    报价
四丁基溴化    CAS号:    3115-68-2    进口、国产
苄基-1-碳酸酯    CAS号:    31166-44-6    现货供应人强啡肽(Dyn)ELISA 试剂盒    96T/48T    试剂盒    组装/原装
人潜伏膜蛋白1(LMP-1)ELISA 试剂盒    96T/48T    试剂盒    组装/原装
人前胰淀粉样蛋白(proIAPP)ELISA试剂盒    96T/48T    试剂盒    组装/原装
人前心钠肽(Pro-ANP)ELISA 试剂盒    96T/48T    试剂盒    组装/原装
人前铁调素(Pro-Hepcidin)ELISA试剂盒    96T/48T    试剂盒    组装/原装
人前列腺特异性抗原(PSA)ELISA 试剂盒    96T/48T    试剂盒    组装/原装
人前列腺特异膜抗原(PSMA)ELISA 试剂盒    96T/48T    试剂盒    组装/原装
人前列腺酸性磷酸酶(PAP)ELISA 试剂盒    96T/48T    试剂盒    组装/原装
人前列腺素F2α(PGF2α)ELISA 试剂盒    96T/48T    试剂盒    组装/原装
人前列腺素F(PGF)ELISA 试剂盒    96T/48T    试剂盒    组装/原装
人前列腺素E2(PGE2)ELISA 试剂盒    96T/48T    试剂盒    组装/原装
人前列腺素E1(PGE1)ELISA 试剂盒    96T/48T    试剂盒    组装/原装

 

 


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