【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称 人非小细胞肺癌细胞；NCI-H838特性
形态特性 上皮样
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞于1984年建系，源于一位59岁患有非小细胞肺癌的白人男性吸烟者，从患者淋巴结转移灶分离而来。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
传代方法 1:3~1:6传代；2~3天换液1次。
传代情况 C5
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法（-）
STR
同工酶
染色体 38~53
使用权限 A类
复苏操作要点：
1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过zui易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
操作步骤：
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片，待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室温孵育爬片20min，使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min（一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢），PBS冲洗3次，每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min，PBS冲洗3次，每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育：按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗，滴加在爬片上，于4°C湿盒中孵育一夜，PBS冲洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：选与一抗对应的二抗，按比例稀释后滴加在爬片上，37°C湿盒中孵育30min，PBS冲洗3次，每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干，爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染：用Harris苏木素复染30s~1min，水洗后用1%的盐酸酒精分化，再用蒸馏水（或PBS）水洗返蓝。
10. 封片：将中性树胶滴在爬片一侧，再用盖玻片盖上，先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
3-苯甲酸甲酯 CAS号： 2557-13-3 进口、国产
4-溴* CAS号： 25574-11-2 现货供应
3-氟苯硫酚 CAS号： 2557-77-9 说明书
2-氨基-2-乙基丁酸 CAS号： 2566-29-2 报价
聚苯乙烯磺酸钠 CAS号： 25704-18-1 进口、国产
甲氨基乙腈盐酸盐 CAS号： 25808-30-4 现货供应
4-氨基-2,6-二氯吡啶 CAS号： 2587/2/2 说明书
2-(N-Boc-3-哌啶基)乙胺 CAS号： 259180-77-3 报价
Boc-L-* CAS号： 2592-18-9 进口、国产
(R)-2-氨甲基-1-N-Boc-吡咯烷 CAS号： 259537-92-3 现货供应
10-氮(杂)蒽 CAS号： 260-94-6 说明书
3-氯-2-氟* CAS号： 2613-22-1 报价人碳酸酐酶(CA)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人炭疽（Anthrax）ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人肽-主要组织相容性复合体复合物(pMHC)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人肽聚糖识别蛋白（PGRP-S）ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人肽聚糖(PG)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人肽基脯氨酰顺反异构酶(PPI)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人胎球蛋白A（FETU-A）ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人胎盘生长因子(PLGF)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人胎盘泌乳素(PL)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人胎盘碱性磷酸酶(PLAP)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人胎盘核糖核酸抑止剂(HPRI)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人胎盘蛋白13（PP13）ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
