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人脑瘤细胞;SF767培养

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所  在  地上海市

更新时间:2017-01-20 13:39:44浏览次数:119次

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产品简介

人脑瘤细胞;SF767培养细胞一般2-3天更换一次培养基,这取决于细胞生长的速度。许多细胞培养实验室通常在周一,周三,周五更换培养基。

详细介绍

【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗

细胞名称  人脑瘤细胞;SF767培养
形态特性   多角
生长特性  贴壁生长
特征特性    
培养条件   MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
传代方法   1:3传代;3~4天1次。
传代情况  C5
冻存条件   基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测  培养法(-)
STR   Amelogenin:X;CSF1PO:11;D13S317:11,13;D16S539:12,13;D18S51:12;D19S433:13,15.2;D21S11:30,31;D2S1338:18;D3S1358:16;D5S818:12;D7S820:9,10;D8S1179:14;FGA:23;TH01:8,9.3;TPOX:8,10;vWA:15,17;
同工酶  
染色体   45~64
使用权限  A类

产品名称人脑瘤细胞;SF767培养
货期3-5天
发货地上海

复苏操作要点: 
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。 
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过zui易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。 
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。 
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。 
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。 
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
操作步骤:
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
LGR6    英文名称:    G蛋白偶联受体6抗体    ?0.2ml
Lambda Light Chain    英文名称:    λ轻链抗体    ?0.1ml
LAMP2    英文名称:    溶酶体相关膜蛋白2抗体    ?0.1ml
LAS2    英文名称:    肺腺瘤易感蛋白2抗体    ?0.2ml
phospho-LEO1(Ser551)    英文名称:    磷酸化RNA聚合酶相关蛋白LEO1抗体    ?0.1ml
LATS2    英文名称:    肿瘤抑制基因LATS2抗体    ?0.2ml
phospho-LSP1 (Ser204)    英文名称:    磷酸化白细胞F肌动蛋白结合蛋白抗体    ?0.1ml
phospho-LATS2 (Ser83)    英文名称:    磷酸化肿瘤抑制基因LATS2抗体    ?0.1ml
phospho-LSP1 (Ser252)    英文名称:    磷酸化白细胞F肌动蛋白结合蛋白抗体    ?0.1ml
LSP1    英文名称:    白细胞F肌动蛋白结合蛋白抗体    ?0.2mlAnti-Phospho-Acetyl CoA Carboxylase(Ser79) /FITC  荧光素标记兔抗人、大、小鼠、猴、牛磷酸化乙酰*羧化酶抗体IgG    Multi-class antibodies    规格:     0.2ml
Anti-AchE/FITC  荧光素标记乙酰*酶抗体IgG    Multi-class antibodies    规格:     0.2ml
Anti-CHRNA2/FITC  荧光素标记烟碱型乙酰*受体A2(神经型)抗体IgG    Multi-class antibodies    规格:     0.2ml
Anti- Beta-Actin/Gold  金标记β-肌动蛋白抗体IgG    Multi-class antibodies    规格:     0.2ml
Anti-Acinus L/S/FITC  荧光素标记腺泡Acinus L/S抗体IgG    Multi-class antibodies    规格:     0.2ml
Anti-Acinus(phospho S1180)/FITC  荧光素标记腺泡磷酸化Acinus抗体IgG    Multi-class antibodies    规格:     0.2ml
Anti-Ack1/FITC  荧光素标记Ack1抗体IgG    Multi-class antibodies    规格:     0.2ml
Anti-Ack1(Phospho-Tyr284) /FITC  荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化Ack1抗体IgG    Multi-class antibodies    规格:     0.2ml
Anti-Phospho-Ack1(Tyr857/858) /FITC  荧光素标记兔抗人、小鼠磷酸化Ack1抗体IgG    Multi-class antibodies    规格:     0.2ml
Anti-Phospho-Ack1(Tyr326) /FITC  荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化Ack1抗体IgG    Multi-class antibodies    规格:     0.2ml
Anti-ACTH 1-39/FITC  荧光素标记兔抗人、大、小鼠ACTH抗体IgG    Multi-class antibodies    规格:     0.2ml
Anti-ACTH(7-23)/FITC  荧光素标记促肾上腺皮质激素(7-23)抗体IgG    Multi-class antibodies    规格:     0.2ml

 

 

 


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