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上海抚生实业有限公司
人皮肤黑色素瘤细胞;SK-MEL-1特性,质量有保证、*、实验效果好,同时我司为您提供价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明,欢迎前来选购!
产品名称 | 生长特性 | 发货地 | 货期 |
人皮肤黑色素瘤细胞;SK-MEL-1特性 | 贴壁生长 | 上海 | 3-5天 |
细胞名称 人皮肤黑色素瘤细胞;SK-MEL-1特性
形态特性 球形
生长特性 悬浮生长
特征特性 该细胞由Oettgen F及其同事从一名29岁的患有广泛、快速进展性恶性黑色素瘤的白人男性患者的胸导管中分离建立的。该细胞可产生黑色素,电镜检测发现细胞中色素颗粒与自身合成和吞噬作用相关。在63%的恶性黑色素瘤患者和10%其他疾病患者体内发现了针对该细胞系的抗体。
培养条件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
传代方法 维持细胞浓度在1×105~2×105,每周补液2~3次。
传代情况 C5
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:12,13;D13S317:11;D16S539:11,12;D18S51:13,16;D19S433:15,16.2;D21S11:29,32.2;D2S1338:19,23;D3S1358:14,16;D5S818:12,13;D7S820:12;D8S1179:16;FGA:18,20;TH01:6;TPOX:11;vWA:16,17;
同工酶
染色体 53~73,XY
使用权限 A类
来源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,贴壁性好。我们从试剂、包被器皿、冻存原代细胞、新鲜原代细胞、原代细胞的分子学实验等提供全程服务。我司拥有专业的实验室,可无菌操作并提供相关科研项目解决方案以及实验服务。
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量*,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量*,使*的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去*,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止*作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
Anti-c-Abl /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠非受体*激酶c-Abl抗体IgG Multi-class antibodies 规格: 0.2ml
Anti-ABL2/FITC 荧光素标记ABL2抗体IgG Multi-class antibodies 规格: 0.2ml
Anti-ACA11 /FITC 荧光素标记兔抗拟南芥ACA11抗体IgG Multi-class antibodies 规格: 0.2ml
Anti-AHA3 /FITC 荧光素标记兔抗植物蛋白AHA3抗体(拟南芥)IgG Multi-class antibodies 规格: 0.2ml
Anti-ABP/FITC 荧光素标记雄激素结合蛋白抗体IgG Multi-class antibodies 规格: 0.2ml
Anti-Rat IgA/FITC 荧光素标记兔抗大鼠IgA抗体 Multi-class antibodies 规格: 0.2ml
Anti-ABI1/SSH3BP1/FITC 荧光素标记ABI1/SSH3BP1蛋白抗体IgG Multi-class antibodies 规格: 0.2ml
Anti-ACD/PTOP/FITC 荧光素标记肾上腺皮质发育异常蛋白抗体IgG Multi-class antibodies 规格: 0.2ml
Anti-ACE1/FITC 荧光素标记血管紧张素转换酶抗体IgG Multi-class antibodies 规格: 0.2ml
Anti-ACE2/FITC 荧光素标记血管紧张素转换酶2抗体IgG Multi-class antibodies 规格: 0.2ml
Anti-ACEI/FITC 荧光素标记血管紧张素1转换酶抑制剂抗体IgG Multi-class antibodies 规格: 0.2ml
Anti-Acetyl CoA Carboxylase/FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠、猴、牛乙酰*羧化酶抗体IgG Multi-class antibodies 规格: 0.2mlLamin B2 英文名称: 核纤层蛋白B2抗体 ?0.2ml
Laminin alpha 5 英文名称: 层粘蛋白α5抗体 ?0.1ml
L-Citrulline 英文名称: L-瓜氨酸抗体 ?0.2ml
LACE1 英文名称: 泌乳升高蛋白1抗体 ?0.2ml
LAPTM4A 英文名称: 溶酶体相关膜蛋白4α抗体 ?0.2ml
DIF14 英文名称: 分化相关基因14抗体 ?0.2ml
LACTB2 英文名称: β内酰胺酶样蛋白2抗体 ?0.2ml
LRFN3 英文名称: 神经突触粘附样分子4抗体 ?0.2ml
LGALS3BP 英文名称: 可溶半乳糖凝集素3结合蛋白抗体 ?0.2ml
Leptin 英文名称: 瘦素抗体 ?0.1ml
Lipin 1 英文名称: 磷脂酸磷酸酯酶LPIN1抗体 ?0.2ml
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