人结直肠癌细胞；T84复苏来源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等），活力>95%，贴壁性好。我们从试剂、包被器皿、冻存原代细胞、新鲜原代细胞、原代细胞的分子学实验等提供全程服务。我司拥有专业的实验室，可无菌操作并提供相关科研项目解决方案以及实验服务。
细胞名称 人结直肠癌细胞；T84复苏
形态特性 上皮样；多角
生长特性 贴壁生长
特征特性 T84细胞来源于一位72岁的男性结直肠癌患者的肺部转移灶；皮下接种至BALB/c裸鼠并连续传代23次后建立该细胞系。在裸鼠身上传代的过程中，该肿瘤仍保持原始的结直肠癌的组织学特性。T84细胞系生长至汇合状态时形成单层细胞，相邻细胞间有紧密连接和细胞桥粒；该细胞有多种肽类激素和神经递质的受体，维持电解质的定向运输；角蛋白阳性。
培养条件 DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium) 10%FBS
传代方法 1:2~1:4传代；每周2次。
传代情况 C5
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法（-）
STR Amelogenin：X；CSF1PO：10；D13S317：9；D16S539：10，11；D18S51：17；D19S433：13；D21S11：31；D2S1338：23，26；D3S1358：19；D5S818：12；D7S820：8，10；D8S1179：15；FGA：24；TH01：6，9；TPOX：8，11；vWA：17，18；
同工酶
染色体 51~60
使用权限 A类
细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%*培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量*，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
操作步骤：
1）贴壁细胞传代：提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内，吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞，加入适量*，使*的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去*，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止*作用，用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。
2）悬浮细胞传代：将细胞悬液转移到无菌离心管内，1000rpm离心5min，弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养。
? nti-AAT/FITC 荧光素标记α-1抗*抗体IgG Multi-class antibodies 规格： 0.2ml
Anti-AATF/FITC 荧光素标记拮抗凋亡转录因子抗体IgG Multi-class antibodies 规格： 0.2ml
Anti-AATK/FITC 荧光素标记细胞凋亡关联*激酶抗体IgG Multi-class antibodies 规格： 0.2ml
Anti-BTK/ATK /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠蛋白*激酶ATK抗体IgG Multi-class antibodies 规格： 0.2ml
Anti-Phospho-Btk(Tyr223) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠蛋白*激酶ATK抗体IgG Multi-class antibodies 规格： 0.2ml
Anti-Phospho-Btk(Ser180) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠蛋白*激酶ATK抗体IgG Multi-class antibodies 规格： 0.2ml
Anti-ABCA1/FITC 荧光素标记腺苷三磷酸结合盒转运体A1抗体IgG Multi-class antibodies 规格： 0.2ml
Anti-Tap1/ABCB2 /FITC 荧光素标记ATP结合转运因子1抗体IgG Multi-class antibodies 规格： 0.2mllaminin 英文名称： 层粘连蛋白抗体 ?0.1ml
Lpin1 protein 英文名称： Lpin1 抗体 ?0.2ml
Lpin1 protein 英文名称： Lpin1 抗体 ?0.2ml
Lysozyme 英文名称： *抗体 ?0.1ml
Iumbrokinase 英文名称： *抗体 ?0.1ml
Leptin 英文名称： 瘦素抗体 ?0.1ml
Leptin receptor 英文名称： 瘦素受体抗体 ?0.1ml
Leptin receptor(long) 英文名称： 瘦素受体抗体（长） ?0.1ml
LCE1A 英文名称： 晚期包膜蛋白1抗体 ?0.2ml
LANPL 英文名称： 富含*样酸核蛋白抗体 ?0.2ml
LCE2B 英文名称： 晚期包膜蛋白2B抗体 ?0.2ml
