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人神经胶质细胞瘤细胞;U251特性

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所  在  地上海

更新时间:2017-01-20 13:34:11浏览次数:185次

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产品简介

人神经胶质细胞瘤细胞;U251特性,质量有保证、*、实验效果好,同时我司为您提供价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明,欢迎前来选购!

详细介绍

 人神经胶质细胞瘤细胞;U251特性来源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,贴壁性好。我们从试剂、包被器皿、冻存原代细胞、新鲜原代细胞、原代细胞的分子学实验等提供全程服务。我司拥有专业的实验室,可无菌操作并提供相关科研项目解决方案以及实验服务。

产品名称生长特性发货地货期
 人神经胶质细胞瘤细胞;U251特性贴壁生长上海3-5天

细胞名称  
形态特性   多角
生长特性  贴壁生长
特征特性    
培养条件   MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
传代方法   1:3传代;3~4天1次。
传代情况  C5
冻存条件   基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测  培养法(-)
STR   Amelogenin:X;CSF1PO:11,12;D13S317:10,11;D16S539:12;D18S51:13;D19S433:13,15;D21S11:29;D2S1338:22,24;D3S1358:16,17;D5S818:11,12;D7S820:10,12;D8S1179:13,15;FGA:21,25;TH01:9.3;TPOX:8;vWA:16,18
同工酶  
染色体   76~80
使用权限  A类

 细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量*,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
 操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量*,使*的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去*,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止*作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
Anti-14-3-3/FITC  荧光素标记14-3-3蛋白抗体IgG    Multi-class antibodies    规格:     0.2ml
Anti-14-3-3 ζ(phospho Ser58)/FITC  荧光素标记磷酸化14-3-3 ζ抗体IgG    Multi-class antibodies    规格:     0.2ml
Anti-2,4-D/FITC  荧光素标记2,4-二氯苯氧乙酸抗体IgG    Multi-class antibodies    规格:     0.2ml
Anti-4E-BP1/EIF4EBP1/FITC  荧光素标记4E结合蛋白1抗体IgG    Multi-class antibodies    规格:     0.2ml
Anti-4EBP1(phospho Ser64) /FITC  荧光素标记磷酸化4E结合蛋白1抗体IgG    Multi-class antibodies    规格:     0.2ml
Anti-4EBP1(phospho Thr37/46) /FITC  荧光素标记磷酸化4E结合蛋白1抗体IgG    Multi-class antibodies    规格:     0.2ml
Anti-phospho-4EBP1 (Ser65/Thr70)/FITC  荧光素标记磷酸化eIF4E结合蛋白抗体IgG    Multi-class antibodies    规格:     0.2ml
Anti-14-3-3/RBITC  红色荧光素罗丹明标记14-3-3抗体IgG    Multi-class antibodies    规格:     0.2ml
Anti-5-HT/FITC  荧光素标记5-羟色胺抗体IgG    Multi-class antibodies    规格:     0.2ml
Anti-5-HT/RBITC  红色罗丹明标记5-羟色胺抗体IgG    Multi-class antibodies    规格:     0.2ml
Anti-5-HTR1A/FITC  荧光素标记5-羟色胺受体1A抗体IgG    Multi-class antibodies    规格:     0.2ml
Anti-5-HTR1B /FITC  荧光素标记5-羟色胺受体1B抗体IgG    Multi-class antibodies    规格:     0.2ml
Anti-5-HTR2A/FITC  荧光素标记5-羟色胺受体2A抗体IgG    Multi-class antibodies    规格:     0.2mlLeptin    英文名称:    瘦素抗体    ?0.1ml
LMO4    英文名称:    肿瘤自身抗原LMO4抗体    ?0.2ml
Lck/p56-LCK    英文名称:    淋巴细胞特异蛋白*激酶抗体    ?0.2ml
CD85c    英文名称:    白细胞免疫球蛋白样受体8抗体    ?0.2ml
LTB4-R1/BLTR    英文名称:    白三烯B4受体1抗体    ?0.1ml
LIR-6    英文名称:    白细胞免疫球蛋白样受体6抗体    ?0.2ml
 LAG-3/CD223    英文名称:    淋巴细胞活化基因-3抗体    ?0.1ml
LAIR-1    英文名称:    白细胞相关免疫球蛋白样受体1抗体    ?0.2ml
Langerin/CD207    英文名称:    白细胞分化抗原CD207抗体    ?0.2ml
LTB4-R2    英文名称:    白三烯B4受体2抗体    ?0.1ml

 

 

 


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