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上海抚生实业有限公司
人组织细胞淋巴瘤细胞;U937 [U-937]使用说明书细胞一般2-3天更换一次培养基,这取决于细胞生长的速度。许多细胞培养实验室通常在周一,周三,周五更换培养基。
【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称 人组织细胞淋巴瘤细胞;U937 [U-937]使用说明书
形态特性 单核细胞
生长特性 悬浮生长
特征特性 该细胞是由Nilsson K实验室于1974年从一名37岁的患有恶性组织细胞性淋巴瘤的白人男性的胸水中分离建立的。1979年来的研究显示该细胞在人混合淋巴细胞培养物上清、佛波酯、Vit D3、γ-IFN、TNF和*的诱导下可以向终末单核细胞分化。该细胞不合成免疫球蛋白,EBV阴性;可产生*、β-2-微球蛋白,受PMA刺激后可产生TNF-α;表达C3R;可作转染宿主;表达Fas,对TNF和抗Fas的抗体敏感。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
传代方法 维持细胞浓度在1×105~2×106/ml;根据细胞浓度3~4换液1次。
传代情况 C5
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:12;D13S317:10,12;D16S539:12;D18S51:13,14;D19S433:14,16;D21S11:27,29;D2S1338:17,20;D3S1358:16;D5S818:12;D7S820:9,11;D8S1179:12,13;FGA:22,25;TH01:6,9.3;TPOX:8,11;vWA:14,15;
同工酶
染色体 54~60
使用权限 A类
产品名称 | 人组织细胞淋巴瘤细胞;U937 [U-937]使用说明书 |
货期 | 3-5天 |
发货地 | 上海 |
人组织细胞淋巴瘤细胞;U937 [U-937]使用说明书复苏操作要点:
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过zui易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
人组织细胞淋巴瘤细胞;U937 [U-937]使用说明书操作步骤:
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
Laminin 5 英文名称: 层粘连蛋白5(laminin γ2)抗体 ?0.1ml
Lactoperoxidase 英文名称: 唾液过氧化物酶LPO抗体 ?0.1ml
lysozyme 英文名称: *抗体 ?0.1ml
lysozyme 英文名称: *抗体 ?0.1ml
LAD1 英文名称: LAD1蛋白抗体 ?0.1ml
LAP2 alpha 英文名称: *LAP2抗体 ?0.1ml
LRRC6 英文名称: 富含*重复蛋白6抗体 ?0.1ml
LRP12 英文名称: 低密度脂蛋白受体相关蛋白12抗体(抑制肿瘤蛋白7) ?0.2ml
phospho-LLGL1 + LLGL2(Ser650+Ser654) 英文名称: 磷酸化相似肿瘤抑制基因HUGL抗体 ?0.1ml
LDL receptor 英文名称: 低密度脂蛋白受体抗体 ?0.1mlAnti-Phospho-HSP90 alpha (Thr5/7)/FITC 荧光素标记磷酸化热休克蛋白90α抗体IgG Multi-class antibodies 规格: 0.2ml
Anti- Beta-arrestin 1/FITC 荧光素标记β-抑制蛋白1抗体IgG Multi-class antibodies 规格: 0.2ml
Anti-Phospho-beta-Arrestin 1(Ser412) /FITC 荧光素标记磷酸化β抑制蛋白1抗体IgG Multi-class antibodies 规格: 0.2ml
Anti- Beta-arrestin 2/FITC 荧光素标记β-抑制蛋白2抗体IgG Multi-class antibodies 规格: 0.2ml
Anti- Beta-Amyloid(1-16) /FITC 荧光素标记β淀粉样肽(1-16)抗体IgG Multi-class antibodies 规格: 0.2ml
Beta-Amyloid(1-28)/FITC 荧光素标记β淀粉样肽(1-28)抗体IgG Multi-class antibodies 规格: 0.2ml
Anti- Beta-Amyloid(1-40)/FITC 荧光素标记β淀粉样肽(1-40)抗体IgG Multi-class antibodies 规格: 0.2ml
Beta-Amyloid 1-40(CT)/FITC 荧光素标记β淀粉样肽(1-40)C端抗体IgG Multi-class antibodies 规格: 0.2ml
Anti- Beta-Amyloid 1-40(CT)mouse/FITC 荧光素标记β淀粉样肽 1-40 C端抗体IgG Multi-class antibodies 规格: 0.2ml
Anti- Beta-Amyloid 1-42 CT(A Beta1-42)/FITC 荧光素标记β淀粉样肽1-42 (C端抗体)IgG Multi-class antibodies 规格: 0.2ml
人组织细胞淋巴瘤细胞;U937 [U-937]使用说明书Anti- Beta-Amyloid(25-35)/FITC 荧光素标记β淀粉样肽(25-35)抗体IgG Multi-class antibodies 规格: 0.2ml
Beta-Amyloid(31-35)/FITC 荧光素标记β淀粉样肽(31-35)抗体IgG Multi-class antibodies 规格: 0.2ml
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