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上海抚生实业有限公司
人前列腺癌细胞;LNCaP特性,质量有保证、*、实验效果好,同时我司为您提供价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明,欢迎前来选购!
人前列腺癌细胞;LNCaP特性来源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,贴壁性好。我们从试剂、包被器皿、冻存原代细胞、新鲜原代细胞、原代细胞的分子学实验等提供全程服务。我司拥有专业的实验室,可无菌操作并提供相关科研项目解决方案以及实验服务。
产品名称 | 生长特性 | 发货地 | 货期 |
人前列腺癌细胞;LNCaP特性 | 贴壁生长 | 上海 | 3-5天 |
细胞名称
形态特性 上皮样;梭形
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞由Horoszewicz JS于1977年从一名50岁的明确诊断为转移性前列腺癌的白人男性患者的左锁骨上淋巴结细针穿刺的活体组织中分离建立的。5-α-双氢睾酮可影响该细胞的生长和酸性磷酸酶的产生。该细胞不形成均一的单层而是成簇生长,所以传代的时候要反复吹打形成单个细胞;该细胞贴壁不牢,达不到汇合状态,而且会使培养基迅速变酸;传代后48h内一定要保持培养瓶静止.如果此时挪动培养瓶,会使大部分细胞从瓶底脱落。如果出现此种情况,需要重新孵育24~48h使细胞重新贴壁,细胞贴壁后可更换培养基。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
传代方法 1:3~1:6传代;5~7天1次。
传代情况 P50
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:10,11;D13S317:10,12;D16S539:11;D18S51:9,11,12;D19S433:13.2,15;D21S11:29,32.2;D2S1338:16,17;D3S1358:16;D5S818:11,12;D7S820:8.1,9.1,10.3;D8S1179:12,14;FGA:19,20;TH01:9;TPOX:8,9;vWA:16,18;
同工酶
染色体 72~88,XY
使用权限 A类
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量*,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量*,使*的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去*,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止*作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
LF/LTF (Rabbit Lactoferrin) ELISA Kit 兔乳铁传递蛋白/乳铁蛋白 Multi-class antibodies 规格: 96T
c (Rabbit cardiac isoform of Tropnin T) ELISA Kit 兔心肌特异肌钙蛋白T Multi-class antibodies 规格: 96T
LZM (Rabbit Lysozyme) ELISA Kit 兔* Multi-class antibodies 规格: 96T
PRL (Rabbit prolactin) ELISA Kit 兔子催乳素 Multi-class antibodies 规格: 96T
LH (Rabbit luteotropic hormone) ELISA Kit 兔子促黄体激素 Multi-class antibodies 规格: 96T
ABAb (Rabbit anti-brain tissue antibody) ELISA Kit 兔抗脑组织抗体 Multi-class antibodies 规格: 96T
p53 (Rabbit p53/tumor protein) ELISA Kit 兔p53 Multi-class antibodies 规格: 96T
BAX (Rabbit Bcl-2 Assaciated X protein) ELISA Kit 兔Bcl-2相关X蛋白 Multi-class antibodies 规格: 96T
ADR (Rabbit adramycin) ELISA Kit 兔* Multi-class antibodies 规格: 96T
MMP-2/Gelatinase A (Rabbit matrix metalloproteinase 2/Gelatinase A) ELISA Kit 兔基质金属蛋白酶2/明胶酶A Multi-class antibodies 规格: 96T
OSM (Rabbit Oncostatin-M) ELISA Kit 兔抑瘤素M Multi-class antibodies 规格: 96T
ANG-2 (Rabbit Angiopoietin 2) ELISA Kit 兔血管生成素2 Multi-class antibodies 规格: 96T
ANG- II (Rabbit angiotension II ) ELISA Kit 兔血管紧张素Ⅱ Multi-class antibodies 规格: 96T
sFAS/Apo-1 (Rabbit soluble Factor-related Apoptosis) ELISA Kit 兔可溶凋亡相关因子 Multi-class antibodies 规格: 96TKIFC1 英文名称: 驱动蛋白家族成员C1抗体 ?0.2ml
KLHL22 英文名称: Kelch样蛋白22抗体 ?0.2ml
KCND1 英文名称: 电压门控钾通道Kv4.1抗体 ?0.2ml
KCNK3 英文名称: 酸敏感钾离子通道蛋白3抗体 ?0.1ml
Klotho 英文名称: Klotho多肽蛋白抗体 ?0.1ml
KCNN4 英文名称: 钙激活钾通道蛋白4抗体 ?0.1ml
KLHL23 英文名称: Kelch样蛋白23抗体 ?0.2ml
KBTBD10 英文名称: BTB-kelch蛋白家族10抗体 ?0.2ml
KBTBD4 英文名称: BTB-kelch蛋白家族4抗体 ?0.2ml
KLHL24 英文名称: Kelch样蛋白24抗体 ?0.2ml
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