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人小细胞肺癌细胞;NCI-H209复苏

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所  在  地上海市

更新时间:2017-01-20 13:17:46浏览次数:141次

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产品简介

人小细胞肺癌细胞;NCI-H209复苏现货供应,质量有保证、*、实验效果好,同时我司为您提供价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明,欢迎前来选购!

详细介绍

产品名称生长特性发货地货期
人小细胞肺癌细胞;NCI-H209复苏贴壁生长上海3-5天

细胞名称  人小细胞肺癌细胞;NCI-H209复苏
形态特性   上皮样
生长特性  悬浮聚集生长
特征特性   该细胞由Gazdar AF及其同事于1979年从一名小细胞肺癌患者的骨髓转移灶中分离建立,该骨髓标本的获取先于患者的治疗。该细胞是一种典型的小细胞性肺癌细胞,表达较高水平的4种生化标志:神经特异性烯醇、肌酸激酶脑型同工酶、多巴脱羧酶、铃蟾肽样免疫活性。c-myc DNA序列没有扩增;未发现大的结构DNA的异常;该细胞合成与正常肺相当量的p53 mRNA。该细胞以聚集体的形式悬浮生长,只有聚集体中的细胞是有活力的,但是细胞活率无法估计,一般培养基中含有大量的细胞碎片。该细胞表达异常的RB1蛋白,其706 
培养条件   RPMI 1640 (w/o Hepes)  20%FBS
传代方法   1:2传代;5~7天1次。
传代情况  C5
冻存条件   基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测  培养法(-)
STR   Amelogenin:X,Y;CSF1PO:11;D13S317:11;D16S539:9,12;D18S51:13;D19S433:14.2,15;D21S11:32.2;D2S1338:17,20;D3S1358:18,20;D5S818:12;D7S820:9;D8S1179:12,13;FGA:20,24;TH01:7,9;TPOX:8;vWA:18,19;
同工酶  
染色体   
使用权限  A类

来源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,贴壁性好。我们从试剂、包被器皿、冻存原代细胞、新鲜原代细胞、原代细胞的分子学实验等提供全程服务。我司拥有专业的实验室,可无菌操作并提供相关科研项目解决方案以及实验服务。
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量*,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量*,使*的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去*,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止*作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
IL-10 (Rabbit Interleukin 10) ELISA Kit  兔白介素10    Multi-class antibodies    规格:     96T
TNF- Alpha (Rabbit Tumor necrosis factor Alpha) ELISA Kit  兔子肿瘤坏死因子α    Multi-class antibodies    规格:     96T
TGF- Beta (Rabbit Transforming Growth factor Beta) ELISA Kit  兔子转化生长因子β    Multi-class antibodies    规格:     96T
bFGF (Rabbit basic fibroblast growth factor) ELISA Kit  兔子碱成纤维细胞生长因子    Multi-class antibodies    规格:     96T
PGE2 (Rabbit Prostaglandin E2) ELISA Kit  兔子前列腺素E2    Multi-class antibodies    规格:     96T
5-HT (Rabbit 5-Hydroxytryptamine) ELISA Kit  兔子5羟色胺    Multi-class antibodies    规格:     96T
Beta-EP (Rabbit Beta-Endorphin) ELISA Kit  兔子β内啡肽    Multi-class antibodies    规格:     96T
NF-κB p65 (Rabbit nuclear factor-κB p65) ELISA Kit  兔核因子κB亚基p65亲和肽    Multi-class antibodies    规格:     96T
G-CSF (Rabbit Granulocyte Colony Stimulating Factor) ELISA Kit  兔粒细胞集落刺激因子    Multi-class antibodies    规格:     96TKLF13    英文名称:    肠道内富含的Kruppel样因子13    ?0.1ml
ZFP103    英文名称:    锌指蛋白103抗体    ?0.2ml
KGF    英文名称:    纤维母细胞生长因子7抗体    ?0.1ml
KLF2    英文名称:    肺Kruppel样因子抗体    ?0.1ml
KLK5    英文名称:    *5抗体    ?0.1ml
KLK13    英文名称:    *13抗体    ?0.1ml
KLK15    英文名称:    *15抗体    ?0.2ml
KLK2    英文名称:    *2抗体    ?0.1ml
KLK12    英文名称:    *12抗体    ?0.1ml
KiSS1 receptor    英文名称:    G蛋白偶联受体54抗体    ?0.1ml
KIF17    英文名称:    驱动蛋白家族KIF17抗体    ?0.2ml
KLF9    英文名称:    转录因子KLF9抗体    ?0.1ml

 

 


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