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上海抚生实业有限公司
人成骨肉瘤细胞;Saos-2使用说明书细胞一般2-3天更换一次培养基,这取决于细胞生长的速度。许多细胞培养实验室通常在周一,周三,周五更换培养基。
产品名称 | 人成骨肉瘤细胞;Saos-2使用说明书 |
货期 | 3-5天 |
发货地 | 上海 |
细胞名称 人成骨肉瘤细胞;Saos-2使用说明书
形态特性 上皮样;多角形
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞是Fogh J和Trempe G分离和鉴定的众多人类肿瘤细胞系中的一种;该细胞来自一位11岁的白人女性的骨肉瘤组织。患者经过放疗以及氨甲喋呤、*、长春新碱、*和 aramycin-C等多种药物治疗。该细胞在免疫抑制小鼠中不致瘤,细胞表达表皮生长因子EGF受体、转化生长因子β(1型和2型)受体。
培养条件 McCoy's 5A Media (Modified with Tricine) 15%FBS
传代方法 1:2~1:4传代;每周1~2次。
传代情况 C5
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:10;D13S317:12,13;D16S539:12,13;D18S51:15;D19S433:13;D21S11:28,30;D2S1338:18;D3S1358:14,18;D5S818:12;D7S820:8,10;D8S1179:10,12;FGA:22,25;TH01:6,9;TPOX:8;vWA:18;
同工酶
染色体 46~88
使用权限 A类
复苏操作要点:
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过zui易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
操作步骤:
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
ERG/KCNH2 英文名称: 特异钾离子通道蛋白抗体 ?0.1ml
KIF4A 英文名称: 沉默驱动蛋白KIF4A抗体 ?0.2ml
kir 6.1 英文名称: ATP敏感钾离子通道蛋白抗体 ?0.2ml
KIAA1462 英文名称: KIAA1462蛋白抗体 ?0.1ml
KIAA1549 英文名称: KIAA1549蛋白抗体 ?0.1ml
KRV-VP1+KRV-VP2 (C-terminus) 英文名称: 基尔曼氏细小病毒VP1/VP2抗体(大鼠潜在病毒KRV)C端 ?1ml
KLHL20 英文名称: Kelch样蛋白20抗体 ?0.2ml
KLST 英文名称: *抑制剂抗体 ?0.1ml
KLHL7 英文名称: kelch样蛋白7抗体 ?0.2ml
KCNK 9 英文名称: TWIK相关酸敏感钾离子通道蛋白9抗体 ?0.2mlFT3(Mouse Tri-iodothyronine)ELISA Kit 小鼠三碘甲状腺原氨酸 Multi-class antibodies 规格: 48T
C5a(Mouse Complement fragment 5a)ELISA Kit 小鼠补体片断5a Multi-class antibodies 规格: 48T
C3a(Mouse Complement fragment 3a)ELISA Kit 小鼠补体片断3a Multi-class antibodies 规格: 48T
17-OHP(Mouse 17-Hydroxyprogesterone)ELISA Kit 小鼠17羟孕酮 Multi-class antibodies 规格: 48T
FS(Mouse Follistatin)ELISA Kit 小鼠卵泡抑素 Multi-class antibodies 规格: 48T
HD(Mouse Histone Deacetylase)ELISA Kit 小鼠组织蛋白去乙酰化酶 Multi-class antibodies 规格: 48T
E3(Mouse Estriol)ELISA Kit 小鼠雌三醇 Multi-class antibodies 规格: 48T
ASD(Mouse Androstenedione)ELISA Kit 小鼠雄烯二酮 Multi-class antibodies 规格: 48T
F-TESTO(Mouse Free Testoterone)ELISA Kit 小鼠游离睾酮 Multi-class antibodies 规格: 48T
T(Mouse Testoterone)ELISA Kit 小鼠睾酮 Multi-class antibodies 规格: 48T
PROG(Mouse Progesterone)ELISA Kit 小鼠孕激素/孕酮 Multi-class antibodies 规格: 48T
sRANKL(Mouse soluble receptor activator of nuclear factor-kB ligand)ELISA Kit 小鼠可溶核因子κB受体活化因子配基 Multi-class antibodies 规格: 48T
CT(Mouse Calcitonin)ELISA Kit 小鼠降钙素 Multi-class antibodies 规格: 48T
ET-1(Mouse Endothelin 1)ELISA Kit 小鼠内皮素1 Multi-class antibodies 规格: 48T
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