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EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0905特性

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所  在  地上海

更新时间:2017-01-20 12:50:30浏览次数:188次

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产品简介

EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0905特性,质量有保证、*、实验效果好,同时我司为您提供价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明,欢迎前来选购!

详细介绍

EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0905特性来源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,贴壁性好。我们从试剂、包被器皿、冻存原代细胞、新鲜原代细胞、原代细胞的分子学实验等提供全程服务。我司拥有专业的实验室,可无菌操作并提供相关科研项目解决方案以及实验服务。

产品名称生长特性发货地货期
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0905特性悬浮生长上海3-5天

细胞名称  
形态特性   淋巴母细胞样
生长特性  悬浮生长
特征特性   该细胞系来源于一无精症男性患者的外周血。2009年由中科院昆明细胞库通过EB病毒转化的方法建立。 
培养条件   RPMI 1640 (w/o Hepes)  15%NBS
传代方法   1:2传代;5-6天一次
传代情况  P2
冻存条件   基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测  荧光法(-)
STR   -
同工酶  
染色体  
使用权限  A类

细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量*,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量*,使*的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去*,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止*作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
AHSP-90(Mouse Heat Shock Protein 90) ELISA Kit  小鼠热休克蛋白90    Multi-class antibodies    规格:     48T
HSP-70(Mouse Heat Shock Protein 70) ELISA Kit  小鼠热休克蛋白70    Multi-class antibodies    规格:     48T
ADP(Mouse adiponectin) ELISA Kit  小鼠脂联素    Multi-class antibodies    规格:     48T
Hsp-40(Mouse Heat Shock Protein 40) ELISA Kit  小鼠热休克蛋白40    Multi-class antibodies    规格:     48T
A Beta1-40(Mouse amyloid beta peptide 1-40) ELISA Kit  小鼠β淀粉样蛋白    Multi-class antibodies    规格:     48T
IL-8/CXCL8(Mouse interleukin 8) ELISA Kit  小鼠白介素8    Multi-class antibodies    规格:     48T
Cyclin-D3(Mouse Cyclin-D3) ELISA Kit  小鼠细胞周期素D3    Multi-class antibodies    规格:     48T
Cyclin-D2(Mouse Cyclin-D2) ELISA Kit  小鼠细胞周期素D2    Multi-class antibodies    规格:     48T
E(Mouse estrogen) ELISA Kit  小鼠雌激素    Multi-class antibodies    规格:     48T
Cyclin-D1(Mouse Cyclin-D1) ELISA Kit  小鼠细胞周期素D1    Multi-class antibodies    规格:     48TIFI35    英文名称:    干扰素诱导35蛋白抗体    ?0.2ml
ITM2A    英文名称:    完整膜蛋白E25A抗体    ?0.1ml
IFABP    英文名称:    小肠型脂肪酸结合蛋白抗体    ?0.1ml
IDE    英文名称:    胰岛素降解酶抗体    ?0.2ml
IKK beta    英文名称:    KB抑制蛋白激酶β抗体    ?0.1ml
IL-17RD    英文名称:    白介素17受体D抗体    ?0.1ml
IL-17B    英文名称:    白介素-17B抗体    ?0.1ml
IAA    英文名称:    吲哚乙酸/植物生长素单克隆抗体    ?0.2ml
IL-4R    英文名称:    白细胞介素4受体抗体IL-4Rα    ?0.1ml
IL-2R gamma    英文名称:    白介素2受体γ链抗体    ?0.1ml

 

 

 


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