细胞名称 EB病毒转化的人B淋巴细胞；KMY0909培养
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 悬浮生长
特征特性 该细胞系来源于一重度少精症男性患者的外周血。2009年由中科院昆明细胞库通过EB病毒转化的方法建立。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS
传代方法 1:2传代；5-6天一次
传代情况 P2
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 荧光法（-）
STR -
同工酶
染色体
使用权限 A类
复苏操作要点：
1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过zui易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
操作步骤：
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片，待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室温孵育爬片20min，使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min（一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢），PBS冲洗3次，每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min，PBS冲洗3次，每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育：按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗，滴加在爬片上，于4°C湿盒中孵育一夜，PBS冲洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：选与一抗对应的二抗，按比例稀释后滴加在爬片上，37°C湿盒中孵育30min，PBS冲洗3次，每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干，爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染：用Harris苏木素复染30s~1min，水洗后用1%的盐酸酒精分化，再用蒸馏水（或PBS）水洗返蓝。
10. 封片：将中性树胶滴在爬片一侧，再用盖玻片盖上，先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。
phospho-ICAM1(Tyr512) 英文名称： 磷酸化细胞间粘附分子1抗体 ?0.1ml
phospho-ITGB3(Tyr785) 英文名称： 磷酸化整合素β3抗体 ?0.1ml
phospho-IGF1R (Tyr980) 英文名称： 磷酸化胰岛素样生长因子1受体抗体 ?0.1ml
phospho-IGF1R (Tyr1280) 英文名称： 磷酸化胰岛素样生长因子1受体抗体 ?0.1ml
phospho-IGF1R (Tyr1165 + Tyr1166) 英文名称： 磷酸化胰岛素样生长因子1受体抗体 ?0.1ml
phospho-ITGB3(Tyr773) 英文名称： 磷酸化整合素β3抗体 ?0.1ml
IGIP 英文名称： 免疫球蛋白A诱导同源蛋白抗体 ?0.2ml
IL-2 英文名称： 白介素2抗体 ?0.2ml
IL-2 英文名称： 白介素2抗体 ?0.2ml
ID4 英文名称： DNA结合抑制因子4抗体 ?0.1ml
IGF2R 英文名称： 胰岛素样生长因子2受体抗体 ?0.1ml
IKZF3 英文名称： 锌指蛋白Aiolos抗体 ?0.2ml
SOX13 英文名称： 胰岛细胞抗原12/核转录因子SOX13抗体 ?0.2ml
INSC 英文名称： 有丝分裂相关蛋白INSC抗体 ?0.2mlDPD(Mouse deoxypyridinoline) ELISA Kit 小鼠脱氧吡啶酚/脱氧吡啶啉 Multi-class antibodies 规格： 48T
PY(Mouse pyridinium crosslink/PyriLinks) ELISA Kit 小鼠吡啶交联物 Multi-class antibodies 规格： 48T
OPN(Mouse Osteopontin) ELISA Kit 小鼠骨桥素 Multi-class antibodies 规格： 48T
ACTH(mouse adrencocorticotropic hormone) ELISA Kit 小鼠促肾上腺皮质激素 Multi-class antibodies 规格： 48T
ALP-B(Mouse Bone-specific Alkphase B) ELISA Kit 小鼠骨特异碱磷酸酶B Multi-class antibodies 规格： 48T
TFR/CD71(Mouse transferrin receptor) ELISA Kit 小鼠转铁蛋白受体 Multi-class antibodies 规格： 48T
Cys-C(Mouse Cystatin C) ELISA Kit 小鼠半*蛋白酶抑制剂/胱抑素C Multi-class antibodies 规格： 48T
F VIII Ag(Mouse Factor VIII -related Antigen) ELISA Kit 小鼠第八因子相关抗原 Multi-class antibodies 规格： 48T
M2-PK(Mouse Pyruvate Kinase) ELISA Kit 小鼠丙酮酸激酶M2型同工酶 Multi-class antibodies 规格： 48T
PRL(mouse prolactin) ELISA Kit 小鼠催乳素 Multi-class antibodies 规格： 48T
Resistin(Mouse Resistin) ELISA Kit 小鼠抵抗素 Multi-class antibodies 规格： 48T
AChRab(Mouse acetylcholine receptor antibody) ELISA Kit 小鼠乙酰*受体抗体 Multi-class antibodies 规格： 48T
OT/BGP(Mouse Osteocalcin/Bone gla protein) ELISA Kit 小鼠骨钙素/骨*蛋白 Multi-class antibodies 规格： 48T
