【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称 EB病毒转化的人B淋巴细胞；Mao使用说明书
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 悬浮生长
特征特性 该细胞系来源于一男性的外周血。2007年由*昆明细胞库通过EB病毒转化的方法建立。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS
传代方法 1:2传代；5-6天一次
传代情况 P3
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 荧光法（-）
STR -
同工酶
染色体
使用权限 A类
复苏操作要点：
1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过zui易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
操作步骤：
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片，待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室温孵育爬片20min，使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min（一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢），PBS冲洗3次，每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min，PBS冲洗3次，每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育：按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗，滴加在爬片上，于4°C湿盒中孵育一夜，PBS冲洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：选与一抗对应的二抗，按比例稀释后滴加在爬片上，37°C湿盒中孵育30min，PBS冲洗3次，每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干，爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染：用Harris苏木素复染30s~1min，水洗后用1%的盐酸酒精分化，再用蒸馏水（或PBS）水洗返蓝。
10. 封片：将中性树胶滴在爬片一侧，再用盖玻片盖上，先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
IIL-6 英文名称： 白介素6抗体 ?0.1ml
IFNE1 英文名称： 干扰素epsilon 1蛋白抗体 ?0.2ml
phospho-IKK gamma(Ser43) 英文名称： 磷酸化KB抑制蛋白激酶γ抗体 ?0.1ml
phospho-IL-1R1(Tyr496) 英文名称： 磷酸化白介素1受体1抗体 ?0.1ml
IL-3 英文名称： 白介素3抗体 ?0.2ml
IDI1 英文名称： 异戊烯焦磷酸1抗体 ?0.2ml
phospho-IRS1(Ser789) 英文名称： 磷酸化胰岛素受体底物-1抗体 ?0.1ml
phospho-IRS1(Ser636 + Ser639) 英文名称： 磷酸化胰岛素受体底物-1抗体 ?0.1ml
Insig1 英文名称： 胰岛素诱导基因1抗体 ?0.2ml
CD16 英文名称： FC段γ受体3/免疫球蛋白G Fc段受体III抗体 ?0.1ml
phospho-IRAK4 (Thr345) 英文名称： 磷酸化白介素-1受体相关激酶4抗体 ?0.1ml
IQCF1 英文名称： IQCF1蛋白抗体 ?0.2mlBDNF(Mouse Brain derived neurotrophic facor) ELISA Kit 小鼠脑源神经营养因子 Multi-class antibodies 规格： 48T
AIF(Mouse apoptosis inducing factor) ELISA Kit 小鼠凋亡诱导因子 Multi-class antibodies 规格： 48T
ALP(Mouse alkaline phosphatase) ELISA Kit 小鼠碱磷酸酶 Multi-class antibodies 规格： 48T
ANG-4(Mouse Angiopoietin 4) ELISA Kit 小鼠血管生成素4 Multi-class antibodies 规格： 48T
BMPR- II (Mouse Bone morphogenetic protein receptor II ) ELISA Kit 小鼠骨成型蛋白受体Ⅱ Multi-class antibodies 规格： 48T
MHC- III /H-2 III (Mouse major histocompatibility complex- III ) ELISA Kit 小鼠主要组织相容复合体Ⅲ类 Multi-class antibodies 规格： 48T
E-Cad(Mouse E-Cadherin) ELISA Kit 小鼠E钙粘着蛋白/上皮钙黏附蛋白 Multi-class antibodies 规格： 48T
CD30(Mouse Cluster of differentiation 30) ELISA Kit 小鼠CD30分子 Multi-class antibodies 规格： 48T
MHC- II /H-2 II (Mouse major histocompatibility complex- II ) ELISA Kit 小鼠主要组织相容复合体Ⅱ类 Multi-class antibodies 规格： 48T
sEPCR(Mouse soluble endothelial protein C receptor) ELISA Kit 小鼠可溶血管内皮细胞蛋白C受体 Multi-class antibodies 规格： 48T
MECF(ouse eosinophil chemotactic factor) ELISA Kit 小鼠嗜酸粒细胞趋化因子 Multi-class antibodies 规格： 48T
Eotaxin 1/CCL11(Mouse Eotaxin 1) ELISA Kit 小鼠嗜酸粒细胞趋化蛋白 Multi-class antibodies 规格： 48T
E-Selectin/CD62E(Mouse E-Selectin) ELISA kit 小鼠E选择素 Multi-class antibodies 规格： 48T
FAS/CD95(Mouse Factor-related Apoptosis) ELISA Kit 小鼠凋亡相关因子 Multi-class antibodies 规格： 48T
