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上海抚生实业有限公司
人膀胱上皮永生化细胞;SV-HUC-1使用说明书细胞一般2-3天更换一次培养基,这取决于细胞生长的速度。许多细胞培养实验室通常在周一,周三,周五更换培养基。
【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称 人膀胱上皮永生化细胞;SV-HUC-1使用说明书
形态特性 上皮细胞
生长特性 贴壁生长
特征特性 这株细胞是正常膀胱组织用SV40病毒转染建株的。 反复用非洲绿猴肾细胞平板测试检测传染性SV40的生成,结果都呈阴性。 胁迫(如曝露于化学试剂)下可能激活病毒。 ATCC还有一株化学转化的成瘤细胞株,MC-SV-HUC T2,目录号为CRL-9519。
培养条件 F12K 优质胎牛血清,10%
传代方法 消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
传代情况 P(30+5)
冻存条件 *培养基+8%DMSO
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 A类
产品名称 | 人膀胱上皮永生化细胞;SV-HUC-1使用说明书 |
货期 | 3-5天 |
发货地 | 上海 |
复苏操作要点:
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过zui易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
操作步骤:
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
roquois homeobox protein 3 英文名称: Irx3蛋白抗体 ?0.2ml
Intra Acrosomal Protein 英文名称: 顶端体蛋白10抗体 ?0.1ml
human secretory IgA 英文名称: 人分泌型免疫球蛋白A ?0.1ml
ICA1 英文名称: 胰岛细胞自身抗原1抗体 ?0.2ml
Islet 2 英文名称: 胰岛素基因增强结合蛋白2抗体 ?0.2ml
IL-16 英文名称: 白介素-16抗体 ?0.1ml
AIF1 英文名称: 离子钙接头蛋白抗体 ?0.1ml
IRX4 英文名称: Iroquois同源蛋白4抗体 ?0.2ml
IFRD1 英文名称: 干扰素相关发育调节蛋白1抗体(神经生长因子诱导蛋白PC4) ?0.2ml
ILP2 英文名称: 抑制细胞凋亡样蛋白2抗体 ?0.2ml
IFITM1 英文名称: 干扰素诱导跨膜蛋白1抗体 ?0.1ml
IFI44 英文名称: 干扰素诱导蛋白44抗体 ?0.2mlANG- II ELISA Kit 大鼠血管紧张素Ⅱ Multi-class antibodies 规格: 48T
ACE ELISA Kit 大鼠血管紧张素转化酶 Multi-class antibodies 规格: 48T
PF/PFP(Rat Perforin/Pore-forming protein) ELISA Kit 大鼠穿孔素 Multi-class antibodies 规格: 48T
NKA ELISA Kit(Ret) 大鼠神经肽A Multi-class antibodies 规格: 96T
Rat Slit2 ELISA Kit 大鼠Slit2 Multi-class antibodies 规格: 96T
NKB ELISA Kit(Ret) 大鼠神经肽B Multi-class antibodies 规格: 96T
Rat reduced glutathione,GSH ELISA Kit 大鼠还原型* Multi-class antibodies 规格: 96T
L-Selectin/CD62L ELISA Kit 小鼠L选择素 Multi-class antibodies 规格: 48T
Mouse mucin-5 subtype B,MUC5B ELISA kit 小鼠粘蛋白/粘液素5B Multi-class antibodies 规格: 48T
Mouse pituitary adenylate cyclase activating polypeptide,PACAP ELISA Kit 小鼠垂体腺苷酸环化酶激活肽 Multi-class antibodies 规格: 48T
Mouse single stranded DNA Antibody,ssDNA ELISA Kit 小鼠抗单链DNA抗体/变DNA抗体 Multi-class antibodies 规格: 48T
Mouse phosphatidylserine,PS ELISA Kit 小鼠磷脂酰* Multi-class antibodies 规格: 48T
Mouse choline phosphoglyceride,PC/CPG ELISA Kit 小鼠*磷酸甘油酯 Multi-class antibodies 规格: 48T
Mouse Beta-Defensins, Beta-DF ELISA Kit 小鼠β-防御素 Multi-class antibodies 规格: 48T
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