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上海抚生实业有限公司
人原胚肾转化细胞;293 Ad5复苏现货供应,质量有保证、*、实验效果好,同时我司为您提供价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明,欢迎前来选购!
产品名称 | 生长特性 | 发货地 | 货期 |
人原胚肾转化细胞;293 Ad5复苏 | 贴壁生长 | 上海 | 3-5天 |
细胞名称 人原胚肾转化细胞;293 Ad5复苏
形态特性 上皮样;多角
生长特性 贴壁生长
特征特性 293细胞是由腺病毒5型(Ad5)DNA转化原代人胚肾获得的*细胞系。该细胞对人的腺病毒尤其敏感,能受纳高水平的腺病毒DNA。含有5型腺病毒的基因,且能高效表达。此外,293细胞的染色体数目以亚三倍体(hypotriploid)占多数,主流数为64条(30%),高倍体为4.2%。
培养条件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
传代方法 1:3传代,2-3天传一代
传代情况 C35
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR STR鉴定
同工酶
染色体
使用权限 A类
来源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,贴壁性好。我们从试剂、包被器皿、冻存原代细胞、新鲜原代细胞、原代细胞的分子学实验等提供全程服务。我司拥有专业的实验室,可无菌操作并提供相关科研项目解决方案以及实验服务。
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量*,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量*,使*的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去*,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止*作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
IL-1 Alpha ELISA KIT 大鼠白介素1α Multi-class antibodies 规格: 48T
BMPR- II ELISA Kit 大鼠骨成型蛋白受体Ⅱ Multi-class antibodies 规格: 48T
BMPR-1A ELISA Kit 大鼠骨成型蛋白受体1A Multi-class antibodies 规格: 48T
BMP-4 ELISA Kit 大鼠骨成型蛋白4 Multi-class antibodies 规格: 48T
BMP-2 ELISA Kit 大鼠骨成型蛋白2 Multi-class antibodies 规格: 48T
HFABP ELISA Kit rat (Heartfattyacid -bindingprotein) 大鼠心脏脂肪酸结合蛋白 Multi-class antibodies 规格: 96T
CCK-8(Rat cholecystokinin octapeptide) ELISA Kit 大鼠胆囊收缩素/缩胆囊素八肽 Multi-class antibodies 规格: 96T
COX-2(rat cyclooxygenase-2) ELISA KIT 大鼠环加氧酶2 Multi-class antibodies 规格: 96T
BDNF ELISA Kit 大鼠脑源神经营养因子 Multi-class antibodies 规格: 48T
ACV-A ELISA Kit 大鼠活化素A Multi-class antibodies 规格: 48TITIH1 英文名称: 衍生透明质酸相关蛋白抗体 ?0.2ml
INPPL1 英文名称: 肌醇聚磷酸盐磷酸酶样蛋白1抗体 ?0.2ml
Insig2 英文名称: 胰岛素诱导基因2抗体 ?0.1ml
IHH 英文名称: HHG2抗体 ?0.2ml
Interferon alpha 17 英文名称: 干扰素α17抗体 ?0.2ml
IL1RAPL2 英文名称: 白介素1受体9抗体 ?0.2ml
IQGAP3 英文名称: RasGTP酶激活蛋白IQGAP3抗体 ?0.2ml
IRX1 英文名称: Iroquois同源蛋白1抗体 ?0.2ml
ITM2B 英文名称: 跨膜蛋白BRI抗体 ?0.2ml
ITM2C 英文名称: 跨膜蛋白ITM2C抗体 ?0.2ml
IL-31 英文名称: 白细胞介素31抗体 ?0.2ml
human Serum IgA 英文名称: 人血清型免疫球蛋白A抗体 ?0.2ml
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