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上海抚生实业有限公司
EB病毒感染的人外周淋巴细胞;JVM-2培养细胞一般2-3天更换一次培养基,这取决于细胞生长的速度。许多细胞培养实验室通常在周一,周三,周五更换培养基。
产品名称 | EB病毒感染的人外周淋巴细胞;JVM-2培养 |
货期 | 3-5天 |
发货地 | 上海 |
细胞名称 EB病毒感染的人外周淋巴细胞;JVM-2培养
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 悬浮生长
特征特性 该细胞是 J.V.Melo从一位63岁患有套细胞淋巴瘤白人女性外周血中分离建立的,经EBV介导获得永生化,该细胞表达p16和细胞周期蛋白D2,低水平表达细胞周期蛋白D1。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
传代方法 1:3传代,2-3天传一代
传代情况 C10
冻存条件 70% growth medium; 20% FBS; 10% DMSO
支原体检测 阴性
STR STR鉴定
同工酶
染色体
使用权限 A类
复苏操作要点:
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过zui易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
操作步骤:
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
IMPDH1 英文名称: *单磷酸脱氢酶1抗体 ?0.2ml
IFI78 英文名称: 干扰素诱导蛋白P78抗体 ?0.1ml
ICAM5 英文名称: 细胞间粘附分子5抗体 ?0.1ml
IMPAD1 英文名称: 肌醇单磷酸酶IMPA3抗体 ?0.2ml
Integrin Alpha V + Beta 6 英文名称: 整合素αVβ6抗体 ?0.1ml
IL-11RA 英文名称: 白介素11受体α/IL-11Rα抗体 ?0.2ml
ILDR1 英文名称: 免疫球蛋白样结构域受体1抗体 ?0.2ml
IKK Alpha + IKK beta 英文名称: KB抑制蛋白激酶α/β抗体 IKK α/IKK β ?0.1ml
Interferon alpha 11 英文名称: 干扰素α11抗体 ?0.2ml
IFNA10 英文名称: 干扰素α10抗体 ?0.2ml
IFNAR2 英文名称: 干扰素α受体2抗体 ?0.2ml
IFNA21 英文名称: 干扰素α21抗体 ?0.2ml
IFNA4 英文名称: 干扰素α4抗体 ?0.2ml
Interferon alpha 16 英文名称: 干扰素α16抗体 ?0.2mlIL-18 Elisa Kit 大鼠白介素18 Multi-class antibodies 规格: 48T
IL-10 Elisa Kit 大鼠白介素10 Multi-class antibodies 规格: 48T
IGF-2 ELISA Kit 大鼠胰岛素样生长因子2 Multi-class antibodies 规格: 48T
IGF-1 ELISA Kit 大鼠胰岛素样生长因子1 Multi-class antibodies 规格: 48T
IFN- Gamma ELISA Kit 大鼠γ干扰素 Multi-class antibodies 规格: 48T
ICAM-1/CD54 ELISA KIT 大鼠细胞间粘附分子1 Multi-class antibodies 规格: 48T
GM-CSF ELISA Kit 大鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子 Multi-class antibodies 规格: 48T
GDNF ELISA Kit 大鼠胶质细胞系来源的神经营养因子 Multi-class antibodies 规格: 48T
fractalkine/CX3CL1 ELISA Kit 大鼠趋化因子 Multi-class antibodies 规格: 48T
FN ELISA Kit 大鼠纤连蛋白 Multi-class antibodies 规格: 48T
CNTF ELISA Kit 大鼠睫状神经营养因子 Multi-class antibodies 规格: 48T
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