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上海抚生实业有限公司
人肺成纤维细胞;HFL1特性,细胞一般2-3天更换一次培养基,这取决于细胞生长的速度。许多细胞培养实验室通常在周一,周三,周五更换培养基。
人肺成纤维细胞;HFL1特性来源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,贴壁性好。我们从试剂、包被器皿、冻存原代细胞、新鲜原代细胞、原代细胞的分子学实验等提供全程服务。我司拥有专业的实验室,可无菌操作并提供相关科研项目解决方案以及实验服务。
产品名称 | 生长特性 | 发货地 | 货期 |
人肺成纤维细胞;HFL1特性 | 成纤维细胞样 | 上海 | 3-5天 |
细胞名称
形态特性 成纤维细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性
培养条件 F12K 优质胎牛血清,10%
传代方法 消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
传代情况 P(10+5)
冻存条件 *培养基+8%DMSO
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 A类
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量*,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量*,使*的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去*,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止*作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
AOAb(Human Anti-Ovary Antibody,AOAb) ELISA Kit 人抗卵巢抗体 Multi-class antibodies 规格: 48T
anti-CMV IgG(Human anti-cytomegalovirus IgG antibody,anti-CMV IgG) ELISA Kit 人抗巨细胞病毒抗体IgG Multi-class antibodies 规格: 48T
BFP(Human basic fetoprotein,BFP) ELISA Kit 人碱胎儿蛋白 Multi-class antibodies 规格: 48T
anti-RV IgM(Human anti-rubella virus IgM antibody,anti-RV IgM) ELISA Kit 人抗风疹病毒IgM抗体 Multi-class antibodies 规格: 48T
OT(Human oxytocin) ELISA Kit 人催产素 Multi-class antibodies 规格: 48T
PAPP-A(Human pregnancy associated plasma protein A) ELISA Kit 人相关血浆蛋白A Multi-class antibodies 规格: 48T
EMAb(Human Endometrium Antibody,EMAb ) ELISA Kit 人抗子宫内膜抗体 Multi-class antibodies 规格: 48T
AsAb(Human anti-sperm antibody) ELISA Kit 人抗抗体 Multi-class antibodies 规格: 48T
HG(Human Herpes Gestation) ELISA Kit 人疱疹抗体 Multi-class antibodies 规格: 48T
PLGF(Human placenta growth factor) ELISA kit 人胎盘生长因子 Multi-class antibodies 规格: 48T
TM(Human Thrombin) ELISA Kit 人* Multi-class antibodies 规格: 48TGalanin 英文名称: 神经节肽抗体 ?0.2ml
Glutaredoxin 1 英文名称: 谷氧还蛋白/巯基转移酶抗体 ?0.2ml
GPR113 英文名称: G蛋白偶联受体GPR113蛋白抗体 ?0.2ml
GALR1 英文名称: 甘丙肽受体1抗体 ?0.2ml
GADD34 英文名称: 生长抑制DNA损伤基因34抗体 ?0.1ml
GDF1 英文名称: 生长分化因子1抗体 ?0.1ml
GLK 英文名称: 葡萄糖激酶抗体 ?0.1ml
GPR78 英文名称: G蛋白偶联受体78抗体 ?0.2ml
GIG8 英文名称: DNA结合抑制因子2抗体 ?0.1ml
GCP2 英文名称: 粒细胞趋化蛋白2抗体 ?0.1ml
GATA5 英文名称: GATA结合蛋白5抗体 ?0.1ml
GDF9 英文名称: 生长分化因子9抗体 ?0.1ml
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