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人肺成纤维细胞;HFL1特性

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所  在  地上海市

更新时间:2017-01-20 09:18:29浏览次数:182次

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产品简介

人肺成纤维细胞;HFL1特性,细胞一般2-3天更换一次培养基,这取决于细胞生长的速度。许多细胞培养实验室通常在周一,周三,周五更换培养基。

详细介绍

人肺成纤维细胞;HFL1特性来源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,贴壁性好。我们从试剂、包被器皿、冻存原代细胞、新鲜原代细胞、原代细胞的分子学实验等提供全程服务。我司拥有专业的实验室,可无菌操作并提供相关科研项目解决方案以及实验服务。

产品名称生长特性发货地货期
人肺成纤维细胞;HFL1特性成纤维细胞样上海3-5天

细胞名称  
形态特性   成纤维细胞样
生长特性  贴壁生长
特征特性    
培养条件   F12K  优质胎牛血清,10%
传代方法   消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
传代情况  P(10+5)
冻存条件   *培养基+8%DMSO
支原体检测  阴性
STR  
同工酶  
染色体  
使用权限  A类

细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量*,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量*,使*的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去*,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止*作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。

AOAb(Human Anti-Ovary Antibody,AOAb) ELISA Kit  人抗卵巢抗体    Multi-class antibodies    规格:     48T
anti-CMV IgG(Human anti-cytomegalovirus IgG antibody,anti-CMV IgG) ELISA Kit  人抗巨细胞病毒抗体IgG    Multi-class antibodies    规格:     48T
BFP(Human basic fetoprotein,BFP) ELISA Kit  人碱胎儿蛋白    Multi-class antibodies    规格:     48T
anti-RV IgM(Human anti-rubella virus IgM antibody,anti-RV IgM) ELISA Kit  人抗风疹病毒IgM抗体    Multi-class antibodies    规格:     48T
OT(Human oxytocin) ELISA Kit  人催产素    Multi-class antibodies    规格:     48T
PAPP-A(Human pregnancy associated plasma protein A) ELISA Kit  人相关血浆蛋白A    Multi-class antibodies    规格:     48T
EMAb(Human Endometrium Antibody,EMAb ) ELISA Kit  人抗子宫内膜抗体    Multi-class antibodies    规格:     48T
AsAb(Human anti-sperm antibody) ELISA Kit  人抗抗体    Multi-class antibodies    规格:     48T
HG(Human Herpes Gestation) ELISA Kit  人疱疹抗体    Multi-class antibodies    规格:     48T
PLGF(Human placenta growth factor) ELISA kit  人胎盘生长因子    Multi-class antibodies    规格:     48T
TM(Human Thrombin) ELISA Kit  人*    Multi-class antibodies    规格:     48TGalanin    英文名称:    神经节肽抗体    ?0.2ml
Glutaredoxin 1    英文名称:    谷氧还蛋白/巯基转移酶抗体    ?0.2ml
GPR113    英文名称:    G蛋白偶联受体GPR113蛋白抗体    ?0.2ml
GALR1    英文名称:    甘丙肽受体1抗体    ?0.2ml
GADD34    英文名称:    生长抑制DNA损伤基因34抗体    ?0.1ml
GDF1    英文名称:    生长分化因子1抗体    ?0.1ml
GLK    英文名称:    葡萄糖激酶抗体    ?0.1ml
GPR78    英文名称:    G蛋白偶联受体78抗体    ?0.2ml
GIG8    英文名称:    DNA结合抑制因子2抗体    ?0.1ml
GCP2    英文名称:    粒细胞趋化蛋白2抗体    ?0.1ml
GATA5    英文名称:    GATA结合蛋白5抗体    ?0.1ml
GDF9    英文名称:    生长分化因子9抗体    ?0.1ml

 

 


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