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人胚胎 皮肤 肌肉;M-22特性

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所  在  地上海市

更新时间:2017-01-20 09:10:10浏览次数:159次

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产品简介

人胚胎,皮肤,肌肉;M-22特性,细胞一般2-3天更换一次培养基,这取决于细胞生长的速度。许多细胞培养实验室通常在周一,周三,周五更换培养基。

详细介绍

人胚胎,皮肤,肌肉;M-22特性来源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,贴壁性好。我们从试剂、包被器皿、冻存原代细胞、新鲜原代细胞、原代细胞的分子学实验等提供全程服务。我司拥有专业的实验室,可无菌操作并提供相关科研项目解决方案以及实验服务。

细胞名称  人胚胎,皮肤,肌肉;M-22特性
形态特性   成纤维细胞样
生长特性  贴壁生长
特征特性    
培养条件   MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  优质胎牛血清,10%
传代方法   消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
传代情况  PN5
冻存条件   *培养基+8%DMSO
支原体检测  阴性
STR  
同工酶  
染色体  
使用权限  A类

产品名称生长特性发货地货期
人胚胎,皮肤,肌肉;M-22特性贴壁生长上海3-5天

人胚胎,皮肤,肌肉;M-22特性细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量*,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
人胚胎,皮肤,肌肉;M-22特性操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量*,使*的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去*,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止*作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
GPR106    英文名称:    G蛋白偶联受体106抗体    ?0.2ml
G1switch 2    英文名称:    G0/G1期开关调节蛋白2抗体    ?0.2ml
GPR162    英文名称:    G蛋白偶联受体GPR162蛋白抗体    ?0.2ml
GIOT1    英文名称:    锌指蛋白461抗体    ?0.2ml
GPR109A    英文名称:    G蛋白偶联受体109A抗体    ?0.2ml
GKAP1    英文名称:    G激酶锚定蛋白1抗体    ?0.2ml
GIYD2    英文名称:    DNA修复蛋白GIYD2抗体    ?0.2ml
GIDRP88    英文名称:    生长抑制和分化相关蛋白抗体    ?0.2ml
GANP    英文名称:    生发中心相关核蛋白MCM3抗体    ?0.2ml
Glucose 6 Phosphate Dehydrogenase    英文名称:    葡萄糖-6磷酸脱氢酶抗体    ?0.1ml
GATAD1    英文名称:    眼发育相关基因蛋白ODAG抗体    ?0.2ml
GCDFP15    英文名称:    特异囊肿病液体蛋白15    ?0.2mlMYOG(Human myogenin) ELISA Kit  人肌细胞生成素    Multi-class antibodies    规格:     48T
ASP(Human antibody to group A streptococcal polysaccharide) ELISA Kit  人A组链球菌菌壁多糖抗体    Multi-class antibodies    规格:     48T
APCR(Human activated protein C resistance) ELISA Kit  人活化蛋白C抵抗素    Multi-class antibodies    规格:     48T
Ext-N(Human N-terminal extein) ELISA Kit  人N端外显肽    Multi-class antibodies    规格:     48T
SC(Human secretory component) ELISA Kit  人分泌成分    Multi-class antibodies    规格:     48T
ADP(Human Adenosine diphosphate) ELISA Kit  人二磷酸腺苷    Multi-class antibodies    规格:     48T
PG(Human Proteoglycan) ELISA Kit  人蛋白聚糖    Multi-class antibodies    规格:     48T
PYD(Human Pyridinoline) ELISA Kit  人吡啶酚    Multi-class antibodies    规格:     48T
5-HIAA(Human 5-hydroxyindolacetic acid) ELISA Kit  人5羟基吲哚乙酸    Multi-class antibodies    规格:     48T
12-HETE(Human 20-hydroxyeicosatetraenoic acid) ELISA Kit  人12羟二十烷四烯酸    人胚胎,皮肤,肌肉;M-22特性Multi-class antibodies    规格:     48T
Hyp(Human hydroxyproline) ELISA Kit  人羟*    Multi-class antibodies    规格:     48T
NO(Human nitric oxide) ELISA Kit  人一氧化氮    Multi-class antibodies    规格:     48T

 

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