细胞名称 人胚肺成纤维细胞；MRC-5使用说明书
形态特性 成纤维细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 MRC-5细胞系来自14周龄男性胎儿的正常肺组织，该细胞老化前能传代42到46次群体倍增。 它是正常二倍体细胞系，46，XY核型。 模式染色体数为46，概率为70%。此细胞系为2003年6月引进
培养条件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 优质胎牛血清，10%
传代方法 消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
传代情况 P（16+5）
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 B类
复苏操作要点：
1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过zui易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
操作步骤：
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片，待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室温孵育爬片20min，使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min（一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢），PBS冲洗3次，每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min，PBS冲洗3次，每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育：按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗，滴加在爬片上，于4°C湿盒中孵育一夜，PBS冲洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：选与一抗对应的二抗，按比例稀释后滴加在爬片上，37°C湿盒中孵育30min，PBS冲洗3次，每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干，爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染：用Harris苏木素复染30s~1min，水洗后用1%的盐酸酒精分化，再用蒸馏水（或PBS）水洗返蓝。
10. 封片：将中性树胶滴在爬片一侧，再用盖玻片盖上，先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。
SP-40(Human Heat Shock Protein 40) ELISA Kit 人热休克蛋白40 Multi-class antibodies 规格： 48T
HSP-20(Human Heat Shock Protein 20) ELISA Kit 人热休克蛋白20 Multi-class antibodies 规格： 48T
MYS(Human Myosin) ELISA Kit 人肌球蛋白 Multi-class antibodies 规格： 48T
GS(Human Gelsolin) ELISA Kit 人凝溶胶蛋白 Multi-class antibodies 规格： 48T
CRP(Human C-Reactive Protein) ELISA Kit 人C反应蛋白 Multi-class antibodies 规格： 48T
ALD(Human aldosterone) ELISA Kit 人醛固酮 Multi-class antibodies 规格： 48T
MYO/MB(Human Myoglobin) ELISA Kit 人肌红蛋白 Multi-class antibodies 规格： 48T
cTn- I (Human cardiac troponin I ) ELISA Kit 人心肌肌钙蛋白Ⅰ Multi-class antibodies 规格： 48T
Tie1(Human tyrosine kinase with immunoglobulin-like and EGF-like domains 1) ELISA kit 人血管生成素受体/含免疫球蛋白样环和上皮生长因子样域*激酶1 Multi-class antibodies 规格： 48T
ANG-2(Human Angiopoietin 2) ELISA Kit 人血管生成素2 Multi-class antibodies 规格： 48T
ANG-1(Human Angiopoietin 1) ELISA Kit 人血管生成素1 Multi-class antibodies 规格： 48T2 and S phase expressed 1 英文名称： G2期/S期应答相关蛋白1抗体 ?0.2ml
phospho-GATA4 (Ser262) 英文名称： 磷酸化GATA结合蛋白4抗体 ?0.1ml
GATA6 英文名称： GATA结合蛋白6抗体 ?0.1ml
GLP-1(1G9) 英文名称： GLP-1单克隆抗体 ?0.1ml
Granzyme B 英文名称： 颗粒酶B抗体 ?0.1ml
GPR30 英文名称： G蛋白偶联受体30抗体 ?0.1ml
GDAP2 英文名称： *诱导分化相关蛋白2抗体 ?0.2ml
GAPDH 英文名称： 3-磷酸甘油醛脱氢酶 ?0.1ml
GDNFRA 英文名称： GDNF家族受体α-1抗体 ?0.1ml
Gemin 2 英文名称： 运动神经元存活蛋白结合蛋白1抗体 ?0.1ml
GLUT1 英文名称： 葡萄糖转运蛋白1抗体 ?0.1ml
GLUT2 英文名称： 葡萄糖转运蛋白2抗体 ?0.1ml
