【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称 人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞；NK-92 [NK92]培养
形态特性 淋巴母细胞
生长特性 悬浮生长
特征特性 NK-92是从一位患有急进性非霍奇金淋巴瘤的50岁白人男性外周血单核细胞衍生来的一株白细胞介素-2依赖型NK细胞株。 这株细胞对很多恶性细胞有细胞毒性；铬释放试验显示它能杀死K562和Daudi细胞。 NK-92细胞(经过照射以防止增殖)可以有效地用于血液中白血病的体外免疫清扫而不危及血细胞的功能。 NK-92细胞有以下特征： CD2, CD7, CD11a, CD28, CD45, CD54表面标记阳性，CD56亮；CD1, CD3, CD4, CD5, CD8, CD10, CD14, CD16, C
培养条件 α－MEM：Alpha Minimum Essential Medium (with Nucleosides) 优质胎牛血清，10%
传代方法 1:2。3天内可长满。
传代情况 PN5
冻存条件 *培养基+8%DMSO
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 A类
人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞；NK-92 [NK92]培养复苏操作要点：
1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过zui易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞；NK-92 [NK92]培养操作步骤：
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片，待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室温孵育爬片20min，使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min（一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢），PBS冲洗3次，每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min，PBS冲洗3次，每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育：按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗，滴加在爬片上，于4°C湿盒中孵育一夜，PBS冲洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：选与一抗对应的二抗，按比例稀释后滴加在爬片上，37°C湿盒中孵育30min，PBS冲洗3次，每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干，爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染：用Harris苏木素复染30s~1min，水洗后用1%的盐酸酒精分化，再用蒸馏水（或PBS）水洗返蓝。
10. 封片：将中性树胶滴在爬片一侧，再用盖玻片盖上，先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
IMA(Human Ischemia Modified Albumin) ELISA Kit 人缺血修饰白蛋白 Multi-class antibodies 规格： 48T
8-epi-PGF2 Alpha(Human 8-epi-prostaglandin F2alpha0 ELISA Kit 人8-异构前列腺素F2α Multi-class antibodies 规格： 48T
sVE-Cadherin (Human Vascular Endothelial-Cadherin Complex) ELISA Kit 人血管内皮钙粘着蛋白复合体 Multi-class antibodies 规格： 48T
Alpha-SMA(Human Alpha-Smooth muscle actin) ELISA Kit 人α平滑肌肌动蛋白 Multi-class antibodies 规格： 48T
Alpha-SCA(Human Alpha-sarcomeric actin) ELISA Kit 人α横纹肌肌动蛋白 Multi-class antibodies 规格： 48T
SMM(Human smooth muscle Myosin) ELISA Kit 人平滑肌肌球蛋白 Multi-class antibodies 规格： 48T
c(Human cardiac isoform of Tropnin T) ELISA Kit 人心肌特异肌钙蛋白T Multi-class antibodies 规格： 48T
MHC(Human myosin heavy chain) ELISA Kit 人肌球蛋白重链 Multi-class antibodies 规格： 48T
HSP-27(Human heat shock protein 27) ELISA Kit 人热休克蛋白27 Multi-class antibodies 规格： 48T
ANG(Human angiostatin) ELISA Kit 人血管抑素/血管稳定蛋白 Multi-class antibodies 规格： 48T
h-FABP(Human heart fatty acid binding protein) ELISA Kit 人心型脂肪酸结合蛋白 Multi-class antibodies 规格： 48TGRID2IP 英文名称： *受体δ2/GluR-δ2抗体 ?0.2ml
Glycophorin A 英文名称： 血型糖蛋白A/涎糖蛋白抗体 ?0.1ml
GAD67 英文名称： *脱羧酶67抗体 ?0.1ml
GADD45 英文名称： 生长抑制DNA损伤基因45抗体 ?0.1ml
GIP 英文名称： 胃泌素抑制肽抗体 ?0.1ml
GLUT4 英文名称： 葡萄糖转运蛋白4抗体 ?0.1ml
glypican 3 英文名称： 磷脂酰基醇蛋白聚糖-3抗体 ?0.1ml
Glucocorticoid receptor(GR) 英文名称： 糖皮质激素受体抗体 ?0.1ml
人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞；NK-92 [NK92]培养GLP-1 (7-36) 英文名称： 胰高血糖素样肽-1抗体 ?0.1ml
GLUT3 英文名称： 葡萄糖转运蛋白3抗体 ?0.1ml
Gelsolin 英文名称： 凝溶胶蛋白抗体 ?0.1ml
GHRH 英文名称： 生长激素释放激素抗体 ?0.1ml
G
