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人B淋巴母细胞;HMy2.CIR特性

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所  在  地上海市

更新时间:2017-01-19 17:14:36浏览次数:196次

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产品简介

人B淋巴母细胞;HMy2.CIR特性,质量有保证、*、实验效果好,同时我司为您提供价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明,欢迎前来选购!

详细介绍

人B淋巴母细胞;HMy2.CIR特性来源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,贴壁性好。我们从试剂、包被器皿、冻存原代细胞、新鲜原代细胞、原代细胞的分子学实验等提供全程服务。我司拥有专业的实验室,可无菌操作并提供相关科研项目解决方案以及实验服务。

产品名称生长特性发货地货期
人B淋巴母细胞;HMy2.CIR特性成纤维细胞样上海3-5天

细胞名称  
形态特性   淋巴母细胞
生长特性  悬浮生长
特征特性   ARH-77细胞株的快速生长突变株HMy.2 B用γ射线照射,选择HLA I型抗原表达缺失的细胞,得到HMy2.CIR细胞株。 这株细胞不表达HLA A位点和B位点的产物,但表达少量HLA Cw4。 这株细胞适于用作I型主要组织相容性抗原基因的转染宿主。 有报道称ARH-77细胞株呈EB核抗原阳性(EBNA+)和EB病毒荚膜抗原阳性(EBVCA+)。 由于Hmy2.CIR细胞株起源于ARH-77细胞株的快速生长突变株HMy.2 B,推测它也是EBNA+。  
培养条件   IMDM: Iscove's Modiefied Dulbecco's Medium  优质胎牛血清,10%
传代方法   1:2。3天内可长满。
传代情况  PN5
冻存条件   *培养基+8%DMSO
支原体检测  阴性
STR  
同工酶  
染色体  
使用权限  A类

细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量*,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量*,使*的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去*,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止*作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
GGLT8D1    英文名称:    糖基转移酶8结构域1抗体    ?0.2ml
Metabotropic Glutamate Receptor 2    英文名称:    促代谢型*受体2抗体    ?0.1ml
GPKOW    英文名称:    G蛋白修补结构域蛋白5抗体    ?0.2ml
GCNT6    英文名称:    β1-6 N-乙酰氨基葡萄糖转移酶6抗体    ?0.2ml
Gibberellins    英文名称:    牛磺酸/β-氨基乙磺酸抗体    ?0.1ml
Gibberellins    英文名称:    赤霉素抗体    ?0.1ml
GNRPX    英文名称:    *核苷酸结合蛋白X抗体    ?0.2ml
GRAMD2    英文名称:    GRAM结构域蛋白2抗体    ?0.2ml
GGTLC2    英文名称:    γ-谷氨酰转移酶轻链2抗体    ?0.2ml
PCDHGA1    英文名称:    原钙粘蛋白γA1抗体    ?0.2ml
GPR70    英文名称:    G蛋白偶联受体70抗体    ?0.2ml
GPR71    英文名称:    G蛋白偶联受体71抗体    ?0.2mlAAgtr I a(Human angiotensin II receptor type I a) ELISA Kit  人血管紧张素Ⅱ受体Ⅰa型    Multi-class antibodies    规格:     48T
ANGPTL3(Human angiopoietin-like protein 3) ELISA Kit  人血管生成素样蛋白3    Multi-class antibodies    规格:     48T
Alpha Actin(Human Alpha-Actin) ELISA Kit  人α肌动蛋白    Multi-class antibodies    规格:     48T
ANKRD1(Human cardiac ankyrin repeat domain 1) ELISA Kit  人心肌锚蛋白重复域1    Multi-class antibodies    规格:     48T
LEPR(Human Leptin Receptor) ELISA Kit  人瘦素受体    Multi-class antibodies    规格:     48T
AT2R(Human Angiotensin II Receptor 2) ELISA Kit  人血管紧张素Ⅱ受体2    Multi-class antibodies    规格:     48T
ANG II R-1(Human angiotension II receptor 1) ELISA Kit  人血管紧张素Ⅱ受体1    Multi-class antibodies    规格:     48T
ANG-4(Human Angiopoietin 4) ELISA Kit  人血管生成素4    Multi-class antibodies    规格:     48T
sMHC-1(Human soluble myosin heavy chain 1) ELISA Kit  人可溶肌球蛋白重链1    Multi-class antibodies    规格:     48T
HSF-1(Human Heat Shock Factor 1) ELISA Kit  人热休克因子1    Multi-class antibodies    规格:     48T
VPI(Human vasopeptidase inhibitors) ELISA Kit  人血管活肽酶抑制剂    Multi-class antibodies    规格:     48T
CMLC-1(Human Cardiac myosin-light chains 1) ELISA Kit  人心肌肌凝蛋白轻链1    Multi-class antibodies    规格:     48T

 

 


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