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上海抚生实业有限公司
人胚肾细胞;293 [HEK-293]复苏现货供应,质量有保证、*、实验效果好,同时我司为您提供价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明,欢迎前来选购!
人胚肾细胞;293 [HEK-293]复苏来源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,贴壁性好。我们从试剂、包被器皿、冻存原代细胞、新鲜原代细胞、原代细胞的分子学实验等提供全程服务。我司拥有专业的实验室,可无菌操作并提供相关科研项目解决方案以及实验服务。
产品名称 | 生长特性 | 发货地 | 货期 |
人胚肾细胞;293 [HEK-293]复苏 | 成纤维细胞样 | 上海 | 3-5天 |
细胞名称 人胚肾细胞;293 [HEK-293]复苏
形态特性 上皮样
生长特性 贴壁生长
特征特性 早期报道中指出该细胞基因组中含有腺病毒5(Ad5)基因组的左侧端和右侧端的DNA,但是现在明确了只存在其左侧端的DNA。经过对Ad5的插入点的克隆测序发现,Ad5的1~4344位线性核苷酸整合入细胞染色体19q13.2。该细胞为人类腺病毒载体扩增的宿主。可表达异常的玻连蛋白的细胞表面受体,由整合素β1亚单位和玻连蛋白受体α-v亚单位组成。生物安全级别为2级。
培养条件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 新生牛血清,10%
传代方法 1:2-1:4
传代情况 P35
冻存条件 基础培养液+20%牛血清+10%DMSO
支原体检测 培养法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:11,12;D13S317:12,14;D16S539:9,13;D18S51:17,18;D21S11:28,30.2;D3S1358:15,17;D5S818:8,9;D7S820:11,12;D8S1179:12,14;FGA:23;PentaD:9,10;PentaE:7,15;TH01:7,9.3;TPOX:11;vWA:16,19
同工酶 人B,NP,G9PG,MD,AST
染色体
使用权限 A类
人胚肾细胞;293 [HEK-293]复苏细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量*,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
人胚肾细胞;293 [HEK-293]复苏操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量*,使*的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去*,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止*作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
Glypican 5 英文名称: 磷脂酰基醇蛋白聚糖-5抗体 ?0.2ml
GADD45GIP1 英文名称: GADD45γ相互作用蛋白1抗体 ?0.2ml
GTPBP4 英文名称: GTP结合蛋白4抗体(慢肾功能衰竭蛋白) ?0.2ml
phospho-GABBR1 (Ser923) 英文名称: 磷酸化gamma氨基丁酸B型受体1抗体 ?0.1ml
phospho-Gria2 (Ser880) 英文名称: 磷酸化*受体2抗体 ?0.1ml
phospho-GNA12(Ser68) 英文名称: 磷酸化鸟苷酸调节蛋白12抗体 ?0.1ml
GATA-1 英文名称: 珠蛋白转录因子1抗体 ?0.1ml
GPX3 英文名称: *过氧化酶3 ?0.1ml
GPX4 英文名称: *过氧化酶4抗体 ?0.2ml
GOLPH2 英文名称: 高尔基体膜蛋白GP73抗体 ?0.2ml
GPR172B 英文名称: G蛋白偶联受体172B抗体 ?0.2ml
GCET2 英文名称: 生发中心B淋巴细胞相关蛋白2抗体 ?0.2ml
GNAT3 英文名称: G蛋白转录因子α3抗体 ?0.2mlSOD(Human Super Oxidase Dimutase) ELISA Kit 人超氧化物歧化酶 Multi-class antibodies 规格: 48T
DPP IV (Human dipeptidyl peptldase IV ) ELISA Kit 人二肽基肽酶Ⅳ Multi-class antibodies 规格: 48T
HD(Human Histone Deacetylase) ELISA Kit 人组织蛋白去乙酰化酶 Multi-class antibodies 规格: 48T
Human Methylase ELISA Kit 人甲基化酶 Multi-class antibodies 规格: 48T
TRACP-5b9Human tartrate-resistant acid phosphatase 5b) ELISA Kit 人抗酒石酸酸磷酸酶5b Multi-class antibodies 规格: 48T
PI3K(Human Phosphotylinosital 3 kinase) ELISA Kit 人磷酸肌醇3激酶 Multi-class antibodies 规格: 48T
PKB(Human protein kinase B) ELISA Kit 人蛋白激酶B Multi-class antibodies 规格: 48T
HO-2(Human heme oxygenase 2) ELISA Kit 人血红素氧合酶2 Multi-class antibodies 规格: 48T
M2-PK (Human Pyruvate Kinase) ELISA Kit 人丙酮酸激酶M2型同工酶 Multi-class antibodies 规格: 48T
人胚肾细胞;293 [HEK-293]复苏TPO(Human Thyroid-Peroxidase) ELISA Kit 人甲状腺过氧化物酶 Multi-class antibodies 规格: 48T
AFU(Human alpha-L-fucosidase) ELISA Kit 人αL岩藻糖苷酶 Multi-class antibodies 规格: 48T
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