【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称 人胚肺成纤维细胞；HFL1培养
形态特性 成纤维细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞为稳定二倍体细胞。
培养条件 F12K 10%FBS
传代方法 1:4-1:6，每周换液2-3次
传代情况 P16
冻存条件 90%FBS+10%DMSO
支原体检测
STR Amelogenin:X；CSF1PO:10；D13S317:8；D16S539:9,11；D18S51:15；D21S11:31.2,32.2；D3S1358:15,17；D5S818:11,12；D7S820:11；D8S1179:12,14；FGA:21,24；PentaD:9,14；PentaE:21；TH01:6,9；TPOX:8；vWA:16
同工酶
染色体
使用权限 A类
复苏操作要点：
1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过zui易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
操作步骤：
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片，待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室温孵育爬片20min，使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min（一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢），PBS冲洗3次，每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min，PBS冲洗3次，每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育：按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗，滴加在爬片上，于4°C湿盒中孵育一夜，PBS冲洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：选与一抗对应的二抗，按比例稀释后滴加在爬片上，37°C湿盒中孵育30min，PBS冲洗3次，每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干，爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染：用Harris苏木素复染30s~1min，水洗后用1%的盐酸酒精分化，再用蒸馏水（或PBS）水洗返蓝。
10. 封片：将中性树胶滴在爬片一侧，再用盖玻片盖上，先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
L-LDH(Human L-Lactate Dehydrogenase) ELISA Kit 人L-乳酸脱氢酶 Multi-class antibodies 规格： 48T
ASM(Human acid sphingomyelinase) ELISA Kit 人酸神经鞘磷脂酶 Multi-class antibodies 规格： 48T
ALOX-5(Human arachidonate 5-lipoxygenase) ELISA Kit 人花生四烯酸5脂加氧酶 Multi-class antibodies 规格： 48T
5-LO/LOX(Human 5-lipoxygenase) ELISA Kit 人5脂加氧酶 Multi-class antibodies 规格： 48T
AC-1(Human adenylyl cyclase 1) ELISA Kit 人腺苷酸环化酶1 Multi-class antibodies 规格： 48T
sAC(Human Soluble Adenylate Cyclase) ELISA Kit 人可溶腺苷酸环化酶 Multi-class antibodies 规格： 48T
ODC(Human Ornithine decarboxylase) ELISA Kit 人*脱羧酶 Multi-class antibodies 规格： 48T
PTK/CD115(Human protein tyrosine kinase) ELISA Kit 人蛋白*激酶 Multi-class antibodies 规格： 48T
PTP/PTPase/CD148(Human protein tyrosine phosphatase) ELISA Kit 人蛋白*磷酸酶 Multi-class antibodies 规格： 48T
TACE(Human TNF Alpha converting enzyme) ELISA Kit 人肿瘤坏死因子α转化酶 Multi-class antibodies 规格： 48T
PMN Elastase(Human Polymorphonuclear Elastase) ELISA Kit 人多形核白细胞弹蛋白酶 Multi-class antibodies 规格： 48T
uPA/PLAU(Human urokinase-type plasminogen activator) ELISA Kit 人*型纤溶酶原激活物 Multi-class antibodies 规格： 48T
KLK 8(Human urokinase-type plasminogen activator) ELISA Kit 人*8 Multi-class antibodies 规格： 48TGPR110 英文名称： G蛋白偶联受体110抗体 ?0.2ml
GPR12 英文名称： G蛋白偶联受体12抗体 ?0.2ml
GPR124 英文名称： 肿瘤血管内皮标志物/G蛋白偶联受体124抗体 ?0.2ml
GPR58 英文名称： G蛋白偶联受体58抗体 ?0.2ml
GPR128 英文名称： G蛋白偶联受体128抗体 ?0.2ml
GPR128 英文名称： G蛋白偶联受体128抗体 ?0.2ml
GPR146 英文名称： G蛋白偶联受体146抗体 ?0.2ml
GPR146 英文名称： G蛋白偶联受体146抗体 ?0.2ml
GPR17 英文名称： G蛋白偶联受体17抗体 ?0.2ml
GPR19 英文名称： G蛋白偶联受体19抗体 ?0.2ml
GPR20 英文名称： G蛋白偶联受体20抗体 ?0.2ml
GPR21 英文名称： G蛋白偶联受体21抗体 ?0.2ml
GPR22 英文名称： G蛋白偶联受体22抗体 ?0.2ml
GPR25 英文名称： G蛋白偶联受体25抗体 ?0.2ml
GPR26 英文名称： G蛋白偶联受体26抗体 ?0.2ml
