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人胚胎胰腺组织来源细胞;CCC-HPE-2使用说明书

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所  在  地上海市

更新时间:2017-01-19 16:50:47浏览次数:196次

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产品简介

人胚胎胰腺组织来源细胞;CCC-HPE-2使用说明书,细胞一般2-3天更换一次培养基,这取决于细胞生长的速度。许多细胞培养实验室通常在周一,周三,周五更换培养基。

详细介绍

【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗

产品名称人胚胎胰腺组织来源细胞;CCC-HPE-2使用说明书
货期3-5天
发货地上海

细胞名称  人胚胎胰腺组织来源细胞;CCC-HPE-2使用说明书
形态特性  
生长特性  贴壁生长
特征特性   取材自引产的11周胚胎组织,中国医学*基础医学研究所细胞资源中心建立。 
培养条件   DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  20%FBS
传代方法   1:3传代;3~4天1次。
传代情况  P7
冻存条件   基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测  培养法(-)
STR   Amelogenin:X,Y;CSF1PO:10,12;D13S317:9,11;D16S539:11,13;D18S51:12,13;D19S433:13,14;D21S11:29;D2S1338:17,23;D3S1358:16;D5S818:9,11;D7S820:10,12;D8S1179:10,13;FGA:21,25;TH01:7,9;TPOX:8,11;vWA:14,16;
同工酶  
染色体   
使用权限  A类

复苏操作要点: 
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。 
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过zui易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。 
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。 
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。 
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。 
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
操作步骤:
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
CYP21B(Human Cytochrome P450c21/21-hydroxylase) ELISA Kit  人细胞色素P450c21B/21-羟化酶    Multi-class antibodies    规格:     48T
TdT(Human terminal deoxynucleotidyl transferase) ELISA Kit  人末端脱氧核苷酸转移酶    Multi-class antibodies    规格:     48T
IDO(Human indoleamine 2,3-dioxygenase) ELISA Kit  人吲哚胺2,3-双加氧酶    Multi-class antibodies    规格:     48T
PRSS(Human serine protease) ELISA Kit  人*蛋白酶    Multi-class antibodies    规格:     48T
Syk(Human spleen tyrosine kinase) ELISA Kit  人脾脏*激酶    Multi-class antibodies    规格:     48T
STK(Human serine/threonine protein kinase) ELISA Kit  人*/*蛋白磷酸酶    Multi-class antibodies    规格:     48T
IRAK(Human interleukin receptor associated kinase) ELISA Kit  人白介素受体相关激酶    Multi-class antibodies    规格:     48T
UK(Human urokinase) ELISA Kit  人*    Multi-class antibodies    规格:     48T
PCK(Human phosphoenolpyruvate carboxykinase) ELISA Kit  人磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶    Multi-class antibodies    规格:     48T
Human trypsin ELISA Kit   人*    Multi-class antibodies    规格:     48T
BACE1(Human Beta-site APP-Cleaving Enzyme 1) ELISA kit  人β位淀粉样前体蛋白裂解酶1    Multi-class antibodies    规格:     48TGRIK2 + GRIK3    英文名称:    *受体红藻氨酸离子2/3抗体    ?0.2ml
GluA4    英文名称:    离子型*受体4抗体    ?0.2ml
phospho-GluA4 (Ser862)    英文名称:    磷酸化离子型*受体4抗体    ?0.1ml
GRM1    英文名称:    代谢型*受体1A抗体    ?0.2ml
CKS2    英文名称:    细胞周期蛋白依赖激酶调节亚基2抗体    ?0.2ml
GRK3    英文名称:    β肾上腺素能受体激酶2抗体    ?0.2ml
GNAL    英文名称:    腺苷酸环化酶Gα蛋白/Gαs/olf抗体    ?0.2ml
GAK protein    英文名称:    细胞周期蛋白G相关激酶抗体    ?0.2ml
GLT8D1    英文名称:    糖基转移酶8结构域1抗体    ?0.2ml
RNF27    英文名称:    环指蛋白27抗体    ?0.2ml
GC1q R    英文名称:    透明质酸结合蛋白1抗体    ?0.2ml
GRK6    英文名称:    G蛋白偶联受体激酶6抗体    ?0.2ml
GRAF1     英文名称:    Rho GTP酶激活蛋白26抗体    ?0.1ml

 

 


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