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上海抚生实业有限公司
人永生化表皮细胞;HaCaT特性现货供应,质量有保证、*、实验效果好,同时我司为您提供价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明,欢迎前来选购!
人永生化表皮细胞;HaCaT特性来源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,贴壁性好。我们从试剂、包被器皿、冻存原代细胞、新鲜原代细胞、原代细胞的分子学实验等提供全程服务。我司拥有专业的实验室,可无菌操作并提供相关科研项目解决方案以及实验服务。
产品名称 | 生长特性 | 发货地 | 货期 |
人永生化表皮细胞;HaCaT特性 | 成纤维细胞样 | 上海 | 3-5天 |
细胞名称
形态特性 上皮细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞源自一位62岁患有黑色素瘤男性的病灶外围正常皮肤,角蛋白、角化细胞交联外膜蛋白、中间丝相关蛋白阳性。
培养条件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 15%FBS
传代方法 1:10~1:20传代,每周换液2~3次
传代情况 C2
冻存条件 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:9,11;D13S317:10,12;D16S539:9,12;D18S51:12;D19S433:13,14;D21S11:30.2;D2S1338:17,25;D3S1358:16;D5S818:12;D7S820:9,11;D8S1179:14;FGA:24;TH01:9.3;TPOX:11,12;vWA:16,17,OL;
同工酶
染色体 72~88
使用权限 A类
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量*,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
人操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量*,使*的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去*,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止*作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
GPR102 英文名称: G蛋白偶联受体GPR102蛋白抗体 ?0.2ml
GPR37L1 英文名称: G蛋白偶联受体GPR37样蛋白1抗体 ?0.2ml
GPR105 英文名称: G蛋白偶联受体GPR105蛋白抗体 ?0.2ml
GPR12 英文名称: G蛋白偶联受体GPR12蛋白抗体 ?0.2ml
GPR110 protein 英文名称: G蛋白偶联受体GPR110蛋白抗体 ?0.2ml
GPR125 英文名称: G蛋白偶联受体GPR125蛋白抗体 ?0.2ml
GPCR RTA 英文名称: G蛋白偶联受体RTA蛋白抗体 ?0.2ml
GPR155 英文名称: G蛋白偶联受体GPR155蛋白抗体 ?0.2ml
GPR30 英文名称: G蛋白偶联受体GPR30蛋白抗体 ?0.2ml
GPR86 英文名称: G蛋白偶联受体GPR86蛋白抗体 ?0.2ml
GPCR HM74 英文名称: G蛋白偶联受体HM74蛋白抗体 ?0.2ml
GMCL1L 英文名称: 细胞样蛋白1样蛋白抗体 ?0.2ml
phospho-GAB2 (Tyr452) 英文名称: 磷酸化接头蛋白Gab 2抗体 ?0.1ml
phospho-GAB2 (Tyr643) 英文名称: 磷酸化接头蛋白Gab2抗体 ?0.1mlsm Actinin- Alpha(Human skeletal muscle Actinin- Alpha) ELISA Kit 人横纹肌辅肌动蛋白α Multi-class antibodies 规格: 48T
BMP-7(Human Bone morphogenetic protein 7) ELISA Kit 人骨成型蛋白7 Multi-class antibodies 规格: 48T
25(OH)D3/25 HVD3(Human 25-Dihydroxy vitamin D3)ELISA Kit 人25羟基*3 Multi-class antibodies 规格: 48T
LTB4(Human Leukotriene B4) ELISA Kit 人白三烯B4 Multi-class antibodies 规格: 48T
iFABP(Human intestinal fatty acid binding protein) ELISA Kit 人肠脂肪酸结合蛋白 Multi-class antibodies 规格: 48T
OxLDL(Human oxidized lowdensity lipoprotein) ELISA Kit 人氧化低密度脂蛋白 Multi-class antibodies 规格: 48T
MPIF-1/CCL23(Human Myeloid Progenitor Inhibitory Factor 1) ELISA Kit 人骨髓抑制因子1 Multi-class antibodies 规格: 48T
ADP(Human adiponectin) ELISA Kit 人脂联素 Multi-class antibodies 规格: 48T
HIS(Human Histamine) ELISA KIT 人组胺 Multi-class antibodies 规格: 48T
Human Resistin ELISA KIT 人抵抗素 Multi-class antibodies 规格: 48T
ALP-B(Human Bone-specific Alkphase B) ELISA Kit 人骨特异碱磷酸酶B Multi-class antibodies 规格: 48T
OT/BGP(Human Osteocalcin/Bone gla protein) ELISA kit 人骨钙素/骨*蛋白 Multi-class antibodies 规格: 48T
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