Human Ac-LDL乙酰化低密度脂蛋白/心血管疾病研究

——清道夫受体/巨噬细胞泡沫细胞形成/内皮细胞/小神经胶质细胞

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搜索关键词：

HDL；LDL；DiI-LDL；氧化修饰Ox-LDL；乙酰化修饰Ac-LDL；Scavenger receptor 清道夫受体；Cholesterol 胆固.*醇；Cholesteryl ester (CE) 胆固.*醇酯 ；Triglyceride (TG) 甘油三酯；Cardiovascular diseases 心血管疾病；Atherosclerosis (AS) 动脉粥样硬化；Macrophages 巨噬细胞；Endothelial cell 内皮细胞；

基本描述：

脂蛋白（Lipoproteins）是血脂在血液中存在、转运及代谢的形式。血清脂蛋白通过超高速离心，并且根据密度大小差异，将脂蛋白分为乳糜微粒（Chylomicron，CM）、极低密度脂蛋白（VLDL）、低密度脂蛋白（LDL）、高密度脂蛋白（HDL）、以及极低密度脂蛋白的代谢中间产物-中间密度脂蛋白（IDL）。这些脂蛋白之间蛋白到脂质的含量不同，特别是在载脂蛋白（apoproteins）和脂质含量不同【见总表1-血浆脂蛋白特性】。

修饰化脂蛋白（氧化修饰，乙酰化修饰）背景介绍：

1. LDL氧化修饰的形成方式

LDL氧化修饰的方式有很多种，常见的有：1）细胞介导的LDL氧化修饰，又称为生物氧化修饰的LDL。如内皮细胞，巨噬细胞，单核细胞都具有此功能；2）过度金属离子Ca2+、Fe²⁺等，在体外适宜条件下与LDL孵育一段时间后，也能使LDL发生氧化变构。因是利用化学物质氧化LDL，故称为化学氧化修饰的LDL。3）还有其他形式的氧化修饰，包括物理方法如紫外线、钴60对LDL进行氧化修饰，或过氧化物酶催化LDL转变成Ox-LDL。

1. LDL氧化修饰的过程

LDL的氧化可人为划分为三个阶段。zui初为迟滞阶段，消耗内源性抗氧化剂（VitE）；增殖阶段，PUFAs快速氧化为脂质氢过氧化物；分解阶段，脂质氢过氧化物转变为反应性的醛。这些醛包括丙二醛（MDA）、4-羟烯酸（4-HNE）等，并可以和ApoB发生共价结合（主要和ApoB的赖氨酸残基结合），形成新的抗原决定簇。Ox-LDL丧失与天然LDL受体结合的能力，被清道夫受体所识别。

1. 氧化修饰后LDL理化的生物学特性

Ox-LDL不同于天然LDL。Ox-LDL内维生宿E含量下降，游离氨基减少，琼脂糖电泳速率增快。LDL中所含的大量卵磷.*脂转变为溶血卵磷.*脂。氧化修饰程度低时，ApoB以分解为主。修饰程度高时，降解的ApoB又可重新聚合成大分子。氧化LDL还具有一系列生物学毒性作用。氧化修饰后的LDL不能经LDL受体代谢，由清道夫受体识别、结合、内吞饮入细胞并丧失正常的胆固.*醇代谢途径，引起细胞内脂质沉积，泡沫样变。

4、 氧化修饰LDL和其它修饰LDL的区别和

氧化的LDL（Oxidized LDL，Ox-LDL）是修饰LDL中的一种，还包括乙酰化LDL、以及丙二醛（MDA）、4-羟烯酸（4-HNE）直接结合的LDL，这些未经氧化修饰，仅仅是经一般化学修饰的LDL称为衍化LDL。两者都可被清道夫受体识别，诱导泡沫细胞的形成。

但两者之间也有些差异，主要表现在：1）细胞生理功能方面，Ox-LDL可诱发细胞毒性作用，影响花生四烯酸代谢，抑制胆固.*醇酯化作用等，但衍化LDL无上述效应；2）Ox-LDL消耗LDL内源性抗氧化物质，使LDL上的维生宿E含量下降，而MDA-LDL无上述效应；3）Ox-LDL涉及脂质过氧化反应，LDL中的PUFAs被氧化。MDA对LDL修饰，是直接和ApoB-100结合成希夫氏碱，脂质过氧化反应轻微；4）LDL的氧化修饰中，在氧化程度低时，ApoB降解；在氧化程度高时，ApoB又可发生再聚合。MDA-LDL的修饰中，ApoB无降解、聚合发生；5）Ox-LDL 的荧光峰波长为430nm，而MDA -LDL的荧光峰波长为460nm。

Ac-LDL（乙酰化修饰低密度脂蛋白）的应用：

乙酰化的LDL（Acetylated LDL，Ac-LDL）是修饰LDL中的一种，LDL载脂蛋白上的赖氨酸残基被乙酰化修饰后，不再能结合到LDL受体，进而被含特异性识别修饰LDL的清道夫受体的巨噬细胞和内皮细胞摄取（消化），导致大量带负电荷的脂质小滴进入，产生类似动脉粥样硬化斑块中发现的泡沫样细胞。

本品是由乙酸酐对人血浆来源的纯化LDL进行乙酰化修饰，且进行透析纯化所得。无菌包装，可用PBS磷酸盐缓冲液或细胞培养基直接稀释使用即可。 Ac-LDL可用在内皮细胞和小神经胶质细胞的功能研究，也可用作泡沫样细胞生成的阳性对照。

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注意事项

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

— —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】

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