嘌呤霉素盐酸盐（pac基因筛选抗生素）

搜索关键词：

Puromycin 嘌呤霉素；Streptomyces alboniger 白黑链霉菌；Puromycin N-acetyl-transferaseGene Pac基因；选择性抗生素；蛋白合成抑制剂；慢病毒载体；CRISPR/Cas9系统；CAS：58-58-2；

基本介绍：

1）抗微生物谱（Antimicrobial spectrum）：嘌呤霉素（Puromycin，CAS：58-58-2），来源于白黑链霉菌（Streptomyces alboniger）代谢产物的一种氨基糖苷类抗生素，有效抑制革兰氏阳性菌生长，对抗酸杆菌的抑制活性相对较弱，但对革兰氏阴性菌的抑制活性更弱。还能抑制原生生物、藻类、哺乳动物和昆虫细胞的生长，一般2天内能杀死99%的细胞。

2）作用机制（Mode of action）：嘌呤霉素作为氨酰-tRNA分子3’末端的结构类似物，能够与核糖体的A位点结合并掺入到延伸肽链中，导致肽链合成的*终止，进而阻止蛋白质合成。

3）抗性产生机制（Mode of resistance）：对嘌呤霉素的抗性来自嘌呤霉素产生菌内发现的pac基因，其表达产物嘌呤霉素N-乙酰转移酶（puromycin N-acetyl-transferase）可通过乙酰化嘌呤霉素使其失活。

常见应用：

1）基因筛选用抗生素，用来筛选和维持培养携带pac基因质粒/载体的瞬转或稳转哺乳动物细胞株，特别是慢病毒颗粒感染的细胞株；也用在CRISPR/Cas9基因编辑系统；

相关文献：Zhang WW et al, CRISPR-Cas9-Mediated Genome Editing in Leishmania donovani. MBio. 2015 Jul 21; 6(4):e00861.

2）制备嘌呤霉素溶液以进行嘌呤霉素敏感实验；

3）用作蛋白合成抑制剂，用来研究细胞分化中控制基因顺序表达和协同表达的转录调控机制。

4）抗肿瘤效应和活性（Antitumor effect and activity）

5）抗病锥虫活性（Antitrypansome Activity）

常见筛选浓度：

哺乳动物细胞：1-10 μg/ml，加浓度使用宿主细胞杀灭实验（杀灭曲线）来确定；

大肠杆菌：LB琼脂培养基筛选敏感转化菌株，使用浓度为100-125μg/ml。

以下是针对一些哺乳动物细胞的筛选浓度：

基本特性：

1）化学名：3'-[α-Amino-p-methoxyhydrocinnamamido]-3'-deoxy-N,N-dimethyladenosine dihydrochloride

2）同义名：Stylomycin hydrochloride; CL 13900 dihydrochloride; P638 dihydrochloride; CL16536; NSC 3055;

3）CAS NO：58-58-2

4）分子式：C22H29N7O5·2HCl

5) 分子量：544.43 g/mol

6)  外观：白色至灰白色粉末

7) 纯度：＞98% (HPLC)

8)  熔点：175-177 °C

9) 溶解性：溶于水（50mg/ml），乙醇（~1mg/ml），DMSO（~10mg/ml），PBS，pH 7.2（~10mg/ml)

10) 化学结构图：

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注意事项

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

— —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】

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