Deoxyribonuclease I (DNase I) from Bovine Pancreas

脱氧核糖核酸酶I，来源于牛胰腺

【温馨提示】：

我司（懋康生物）提供两种酶比活的DNase I，都纯化自牛胰腺。

一种为高活性DNase I（比活力≥2000Kunit Units/mg protein），可媲美Sigma公司的D5025；常供类型。

一种为相对低活性DNase I（比活力≥500Kunit Units/mg protein），可媲美Sigma公司的DN25。类型。

关键词：

Deoxyribonucleate 5 –Oligonucleotidohydrolase，5′-寡核苷酸-水解酶，Deoxyribonuclease I (DNase I) from Bovine Pancreas，EC No: 3.1.21.1，CAS NO：9003-98-9

产品描述

脱氧核糖核酸酶I，英文Deoxyribonuclease I，缩写DNase I，在大多数细胞和组织中都能发现的一种核酸内切酶，偏好切割邻近嘧啶的磷酸二酯键，产生5’端为磷酸基团、3’端为羟基的多聚核苷酸，平均消化产物zui小为多聚四核苷酸。Mg²⁺存在条件下，DNase I可随机识别和切断DNA任一条链上的任意位点；而在Mn²⁺存在条件下，DNase I识别DNA的两条链并在几乎相同的位点进行切割。DNase I可水解多种形式DNA，如单链DNA、双链DNA，甚至染色质（其切割速率受组蛋白影响）。

脱氧核糖核酸酶I，英文Deoxyribonuclease I，缩写DNase I，zui早从胰腺中分离而来，至今哺乳动物胰腺也是zui主要的来源之一。DNase I以两对二硫键结合的多种糖蛋白混合形式存在。zuijia的工作范围是pH 7-8，DNase的活性依赖于Ca²⁺，并可被二价金属离子如Co ²⁺，Mn²⁺，Zn²⁺等激活。5mM Ca²⁺可保护酶使其不被水解，而0.1mM Ca²⁺可使酶失活速率降至原来的1/2。

本品来自牛胰腺，色谱纯化制备，常用于去除蛋白或RNA样品中的DNA，或者用于向DNA中引入缺口使标记碱基插入DNA。本品以含氯化钙的冻干粉形式供应，比活≥2000Kunit Units/mg蛋白。

产品特性

1）   CAS NO：9003-98-9

2）   蛋白纯度：≥80%（biuret），色谱纯化

3）   比活力：≥2000Kunit Units/mg protein

4）   活力定义：25℃，pH5.0条件下DNase催化底物DNA，使每毫升每分钟ΔA₂₆₀增加0.001的变化定义为一个酶活力单位（Kunitz unit）。

5）   激活剂：多种二价金属离子如Mg²⁺、Mn²⁺、 Ca²⁺、Co²⁺、and Zn²⁺

6）   抑制剂：β-巯基乙醇；螯合剂；SDS；肌动蛋白；并没有特异性抑制DNase I酶活的通用抑制剂，比如柠檬酸盐抑制Mg²⁺活化的DNase I，但不能影响Mn²⁺激活的DNase I。

7）   溶解性：溶于0.15M NaCl（5mg/ml），无色透明溶液

保存与运输方法

保存：冻干粉-20℃干燥冻存，至少3年稳定。

运输：冰袋运输。

常见问题

1、如何溶解DNase I粉末？

0.15 M NaCl溶液，可配置成5-10 mg/ml的储存液，-20℃分装冻存。需要注意：本品储存液即使-20℃分装冻存，一周可能会有＜10%活力损失；置于2-8℃，约会有20%活力损失。

2、如何将本品活力换算成质量？

2000 Kunits/mg，蛋白含量为100%（biuret）也，那么15KU=15000Kunits/2000Kunits/mg/100%=7.5mg本品。

3、使用多大浓度DNase I用来去除溶液内的DNA？

50mM Tris-HCl（pH7.5），10mM MgCl2的溶液体系内，加入20-50μg DNase I，并于37℃孵育60min以去除DNA污染。本用量仅作参考，具体实验请做适当调整。

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注意事项

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

— —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】

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DNase I 脱氧核糖核酸酶I 分子生物学

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