上海一基实业有限公司

主营产品: 标准品,培养基,Elisa试剂盒

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公司信息

人:
何先生
址:
上海市浦东新区张杨北路5972号
编:
200137
铺:
https://www.afzhan.com/st164954/
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豌豆胰蛋白酶抑制因子(STl)elisa试剂盒实验操作步骤

2022-1-26  阅读(187)

  使用目的:适用于检测人动植物组织匀浆、细胞上清、血清、血浆、尿液或其他相关生物液体中浓度。本试剂盒只能用于科学研究,不得用于临床诊断。
 
  检测原理:试剂盒采用双抗体一步夹心法免疫吸附试验(ELISA) 。往预先包被抗体的微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并*洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
 
  试剂盒规格配置:
 
自备物品:
 
  ①.酶标仪(450nm)
 
  ②.高精度加样器及枪头: 0. 5-10uL、2-20uL、 20-200uL、 200-1000uL
 
  ③.37 C恒温箱
 
  操作步骤:
 
  ①.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4'C。
 
  ②.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50 μL。
 
  ③.样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。
 
  ④.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP) 标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37C水浴锅或恒温箱温育60min。
 
  ⑤.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
 
  ⑥.每孔加入底物A、B各50μL, 37°C避光孵育15min。
 
  ⑦.每孔加入终止液50 μL,15min内, 在450nm波长处测定各孔的0D值。
 
  结果判断:
 
  绘制标准曲线:在Exce I工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应0D值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。


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