深芬仪器CSY-E96D非洲猪瘟检测方法非洲猪瘟快速检测仪 - 实验所需自备试验器材*
- 检测仪(450nm)
- 高精度加样器及枪头:10-200ul 1000-5000ul
- 37℃恒温箱或水浴锅
- 蒸馏水或去离子水
试剂盒组成: 试剂盒组成 | 48孔配置 | 96孔配置 | 保存 | 说明书 | 1份 | 1份 | | 封板膜 | 2片 | 2片 | | 密封袋 | 1个 | 1个 | | 酶标包被板 | 1×48 | 1×96 | 2-8℃保存 | 阴性对照 | 0.5ml*1管 | 0.5ml*1管 | 2-8℃保存 | 阳性对照 | 0.5ml*1管 | 0.5ml*1管 | 2-8℃保存 | 检测抗原-HRP | 5 ml×1瓶 | 10 ml×1瓶 | 2-8℃保存 | 样品稀释液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 | 底物A液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 | 底物B液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 | 终止液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 | 20×浓缩洗涤液 | 15ml×1瓶 | 25ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
非洲猪瘟快速检测仪试剂准备 1. 请提前20分钟从冰箱中取出试剂盒,平衡至室温。 - 从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶,属于正常现象;放置室温,轻摇均匀,待结晶*溶解后再配置洗涤液。可将20ml浓缩洗涤液用蒸馏水或去离子水稀释配置成400ml工作浓度的洗涤液,未用完的放回4℃
- 20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。
非洲猪瘟快速检测仪试剂盒采用双抗一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被非洲猪瘟抗体的包被微孔中,依次加入标本、HRP标记的检测抗原,经过温育并*洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD 值),与CUT OFF值相比较,从而判定标本中非洲猪瘟(ASF)的存在与否。 非洲猪瘟快速检测仪前处理方法 1:血清:使用不含热源和内素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞小心地分离 方法2:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。 2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠或甘素抗凝,离心30分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。 3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。 4. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。 5. 组织标本:将组织加入适量生理盐捣碎,3000转离心10分钟取上清液 6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融. 7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。 非洲猪瘟快速检测仪CSY-E96D非洲猪瘟检测方法czcz作步骤: 1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。 2. 设置阴、阳性对照孔和样本孔,阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照各50μL; 3. 待测样本孔加待测样本10μL,在加样本稀释液40μL; 4. 随后阴、阳性对照孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗原100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。 5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。 6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光水浴锅孵育15min。 7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。 李丹q 2072559023**3122752409 |