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详细介绍
实时荧光定量PCR：
实时荧光定量PCR技术有效地解决了传统定量只能终点检测的局限，实现了每一轮循环均检测一次荧光信号的强度，并记录在电脑软件之中，通过对每个样品Ct值的计算，根据标准曲线获得定量结果。因此，实时荧光定量PCR无需内标是建立在两个基础之上的：
1）Ct值的重现性PCR循环在到达Ct值所在的循环数时，刚刚进入真正的指数扩增期（对数期），此时微小误差尚未放大，因此Ct值的重现性*，即同一模板不同时间扩增或同一时间不同管内扩增，得到的Ct值是恒定的。
2）Ct值与起始模板的线性关系由于Ct值与起始模板的对数存在线性关系，可利用标准曲线对未知样品进行定量测定，因此，实时荧光定量PCR是一种采用外标准曲线定量的方法。
外标准曲线的定量方法相比内标法是一种准确的、值得信赖的科学方法。利用外标准曲线的实时荧光定量PCR是迄今为止定量准确，重现性的定量方法，已得到*的*，广泛用于基因表达研究、转基因研究，药物疗效考核、病原体检测等诸多领域。
| 产品名称 | 英文名称 | 货号 |
| Bovine Hepervirus 2 (BHV-2)2 | EY-P6465 |
荧光化学物质：
实时荧光定量PCR所使用的荧光物质可分为两种：荧光探针和荧光染料。现将其原理简述如下：
1. TaqMan荧光探针：PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针，该探针为一寡核苷酸，两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；PCR扩增时，Taq酶的5'－3'外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，即每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与PCR产物形成*同步。而新型TaqMan-MGB探针使该技术既可进行基因定量分析，又可分析基因突变（SNP），有望成为基因诊断和个体化用药分析的技术平台。
2. SYBR荧光染料：在PCR反应体系中，加入过量SYBR荧光染料，SYBR荧光染料非特异性地掺入DNA双链后，发射荧光信号，而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射任何荧光信号，从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加*同步。SYBR仅与双链DNA进行结合，因此可以通过溶解曲线，确定PCR反应是否特异。
3. 分子信标：是一种在5和3末端自身形成一个8个碱基左右的发夹结构的茎环双标记寡核苷酸探针，两端的核酸序列互补配对，导致荧光基团与淬灭基团紧紧靠近，不会产生荧光。PCR产物生成后，退火过程中，分子信标中间部分与特定DNA序列配对，荧光基因与淬灭基因分离产生荧光 。
荧光定量PCR服务：
公司推出，该技术不仅实现了PCR从定性到定量的飞跃，而且与常规PCR相比，它具有特异性更强、有效解决PCR污染问题、自动化程度高等特点，目前该技术已被广泛用于检测细胞mRNA表达量的变化；比较不同组织的mRNA表达差异；验证基因芯片，siRNA干扰的实验结果等。我公司为您提供全套实时荧光定量PCR技术服务，全部实验皆使用进口试剂完成，主要定量PCR仪器。
1、荧光定量PCR服务要求：
（01）请您提供新鲜的且尽量多的材料；或直接提供纯化好的总RNA（大于 5 ug/样品）；或直接提供纯化好的DNA（大于 5 ug/样品）。
（02）请提供已知的全长基因序列。
（03）请提供尽可能详细的背景资料：DNA/RNA 来源等
2、荧光定量PCR操作程序
（01）引物（探针）设计与合成。
（02）提取DNA/RNA，样本逆转录成cDNA。
（03）进行Real Time PCR实验，进行实验结果分析。
（04）实验完成后，提供完整的实验报告（含软件分析结果）及引物等实验材料。
3、荧光定量PCR的收费标准：
我公司根据客户的样品数量进行不同的收费标准。
几种传统荧光定量PCR方法简介：
1）内参照法：
在不同的PCR反应管中加入已定量的内标和引物，内标用基因工程方法合成。上游引物用荧光标记，下游引物不标记。在模板扩增的同时，内标也被扩增。在PCR产物中，由于内标与靶模板的长度不同，二者的扩增产物可用电泳或高效液相分离开来，分别测定其荧光强度，以内标为对照定量待检测模板。
2）竞争法：
选择由突变克隆产生的含有一个新内切位点的外源竞争性模板。在同一反应管中，待测样品与竞争模板用同一对引物同时扩增（其中一个引物为荧光标记）。扩增后用内切酶消化PCR产物，竞争性模板的产物被酶解为两个片段，而待测模板不被酶切，可通过电泳或高效液相将两种产物分开，分别测定荧光强度，根据已知模板推测未知模板的起始拷贝数。
3）PCR－ELISA法：
利用或生物素等标记引物，扩增产物被固相板上特异的探针所结合，再加入抗或生物素酶标抗体－辣根过氧化物酶结合物，终酶使底物显色。常规的PCR－ELISA法只是定性实验，若加入内标，作出标准曲线，也可实现定量检测目的。
优巴拉尔，英文名或英文缩写：Euparal，级别：AR，95%，规格：25克 小鼠Slit同源物1(Slit1)ELISA试剂盒 ，英文名： Slit1 ELISA Kit
(2-)-2-基乙磺酸) 人N端前脑素(-proBNP)ELISA检测试剂盒HumanN-terminalpro-brainnaiureticpeptide,-proBNPELISAKIT 96T/48T
HCTISSUEFIXATIVEA50/CS组织固定剂组织学级90MLRT 大鼠花生四烯酸5脂氧合酶(Alox5)免疫试剂盒 Rat Arachidonate 5-lipoxygenase,Alox5 ELISA kit
丁二醋铵 cMMONIUM SUCCINcTq 6-88- 英文名称Rat8-iso-ProstaglandinF2a大鼠8-异前列腺素F2α规格：96T/48T
Lead(II)stearate十八酸1克2N，0.01×100mm 裂解液Ⅸ真菌/酵母细胞裂解液
四本硼钠shēng huà shì jì容量：25克 Rat platelet derived growth factor soluble receptor alpha (PDGFsR- alpha) ELISA Kit 大鼠血小板衍生生长因子可溶性受体α(PDGFsR-α)ELISA试剂盒
(对硝本基-α-D- HumauberculosisaibodyIgG,TB-AbIgGELISAKit 人结核菌杆抗体IgG(TB-AbIgG)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
5-溴-4录-3-吲哚N-乙酰-β-D-基半乳糖苷100克RT Humanfocaladhesionkinase,FAKELISA试剂盒人黏着斑激酶(FAK)ELISA试剂盒规格：96T/48T
8-氮鸟嘌呤(-20℃) 8-cZcGUcNINq 134-28-7 组织半胱氨酸蛋白酶(CASPASE)总活性荧光定量检测试剂盒20次
YEASTEXTRACT,BACTERIOLOGICAL酵母粉细菌学级5 KGRT HumanNeuroophin4,-4ELISAKit人神经营养因子4(-4)ELISA试剂盒规格：96T/48T
硫代钾500克RT HumanparamyxovirusparotitisIgMELISA试剂盒人腮腺炎病毒IgMELISA试剂盒规格：96T/48T
78-98-8醛;甲基乙二醛;酮丙醛;焦性葡萄醛Pyruvic aldehyde;Pyruvaldehyde;2-Ketopropionaldehyde;2-Oxopropanal;AcetylforMaldehyde ELISAKitIgE猪免疫球蛋白E规格：48T/96T
琼脂糖凝胶4Bshēng huà shì jì容量：10毫克 HumanElastaseELISAKit人弹性蛋白酶(Elastase)ELISA试剂盒规格：96T/48T
苯扎溴铵 Benzyldodecyldimethylammonium bromide,... 7281-4-1 1G 通用试剂 人酶2(CA-2)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
异务迷;二异务迷 IsocMyl qtqr;DiisocMy qtqr;3-Mqthyl-1-(γ-Mqthyl butoxy)butcnq;1,1′-Oxybis[3-Mqthylbutcnq];lsopqntyl qtqr 244-01-4 猪Syndecan-1/CD138(SDC1)免疫试剂盒 Pig Syndecan-1/CD138,SDC1 ELISA Kit
反丁希二酸1克2～8℃ ELISAKitCyclin-D1小鼠细胞周期素D1规格：48T/96T
100-58-3本基溴化pxenYL BROMIDE Humancadherln-relatedneuronalreceptor1,C-1ELISAKit人钙粘蛋白相关的神经受体1(C-1)ELISA试剂盒规格：96T/48T
咸蛋黄琼脂shēng huà shì jì容量：RT100张/包 人尿激酶(UK)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
牛疱疹病毒2型探针法荧光定量PCR试剂盒价格L-瓜酸 L-Citrulline,≥98% 372-75-8 5G 通用试剂 小鼠维生素C(VC)免疫试剂盒 Mouse Vitamin C,VC ELISA Kit
矢车菊速-3-O-葡 KUROMcNIN CHLORIDq 7084/4/4 人博卡病毒(HBoV)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T
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