球孢子菌通用探针法荧光定量PCR试剂盒说明

参数规格：

产品名称：球孢子菌通用探针法荧光定量PCR试剂盒说明
英文名称：Coccidioidesspp.
货号：EY-P6575
产品规格：50T

分类：荧光定量PCR试剂盒
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。
产品特点：
本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏 PCR检测试剂盒 。
荧光定量PCR试剂盒技术：
本实用新型技术公开了一种实时荧光定量PCR试剂盒，包括盒体，盒体由上盒体和下盒体组成，上盒体的底面上设有限位凸起，下盒体的顶面上设有与限位凸起匹配的凹槽，且在下盒体左右侧壁的下端均软连接有侧盖，侧盖远离下盒体的一端连接有卡勾，下盒体的上端边缘处设有环形凸起，两个卡勾分别勾住环形凸起的左右两端将上盒体固定在下盒体上；凹槽的内部设有固定杆，固定杆上通过转动件转动连接有用于放置试管的试管架；下盒体的左右两侧均设置有收纳槽。本实用新型技术通过将盒体分为上下组合的两个部分，并将两个部分通过侧盖连接，即可保证试剂盒的便携性，同时使用试剂盒自带的试管可提高检测的效率。

产品特点
1. 使用化学修饰的热启动聚合酶，反应特异性高，*程度地避免了非特异扩增；
2. 反应缓冲液经充分优化，反应灵敏快速，40个循环只需20多分钟；
3. 抗干扰能力强，反应重复性高，适合对土壤、粪便、肿瘤和血液来源的复杂样本中的靶基因进行检测分析。
在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，zui后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。
 特异性荧光标记：
 TaqMan法
 TaqMan探针的特性：
（1）5′端标记有报告基团（Reporter, R），如FAM、VIC等
（2）3′端标记有荧光淬灭基团 （Quencher, Q）
（3）探针完整，R所发射的荧光能量被Q基团吸收 ，无荧光， R与Q分开，发荧光
（4）Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性，可水解探针
相对定量通过内标定量：
内标（Endogenous Control）通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因，在细胞中的表达量或在基因组中的拷贝数恒定，受环境因素影响小，内标定量结果代表了样本中所含细胞或基因组数量。
相对定量分析方法  ：
 2-ΔΔCt
前提：目标序列和内参序列的扩增效率接近100％且偏差在5％以内
  1、用内参基因的CT值归一目标基因的CT值：
    ΔCT（test）= CT（target,test）-CT（ref,test） 
    ΔCT（calibrator）= CT（target,calibrator）-CT（ref, calibrator） 
  2、用校准样本的ΔCT值归一试验样本的ΔCT值：
         ΔΔCT= ΔCT（test） - ΔCT（calibrator）
  3、计算表达水平比率：
                    2 –ΔΔCT=表达量的比值

 

荧光定量PCR检测方法包括以下步骤：
(1)将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；
(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。
其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TA cloning载体，所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。
步骤(2)为：待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为肿瘤或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。

胰酪胨大豆酵母浸膏琼脂100克  ELISAKitxR小鼠硫氧还蛋白还原酶规格：48T/96T

TTC 5g/10g/25g/100g原装 Amresco 0765  HumanAi-myocardialaibody,AMAELISAKit人抗心肌抗体(AMA)ELISA试剂盒规格：96T/48T

寡霉素shēng huà shì jì容量：1公斤  人莱姆IgG(Lyme-IgG)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

4-酰基本氧基醋 4-Formylphqnoxyccqtic ccid 04-71-3  小鼠牛小肠碱性酶(CIAP)免疫试剂盒 Mouse Calf iestinal alkaline phosphatase,CIAP ELISA Kit

改良Y培养基shēng huà shì jì容量：RT10克  周期素依赖性激酶2(CDK-2)ELISA试剂盒 ，英文名： CDK-2 ELISA Kit
色素(水溶)100克  ELISAKiF人类风湿因子规格：48T/96T

(无琼脂))  小鼠Apelin小鼠12蛋白(AP12)ELISA试剂盒 ，英文名： AP12 ELISA Kit

铁(III)，英文名或英文缩写：Ferric tartrate，级别：3N，规格：250克  人胶原酶II(CollagenaseII)ELISA检测试剂盒HumanCollagenaseTypeIIELISAKit 96T/48T

安基加醋铵　(+4℃) cMMONIUM CcRBcMcTq 1111-78-0  大鼠脯氨酸羟化酶(PHD)免疫试剂盒 Rat prolyl hydroxylases,PHD ELISA Kit

马来醋二丁基锡 Dibutyltin mclqctq 1978-4-6  CLIAKitforU-TSH(Mouseulasensitivethyroid-stimulatinghormone)ELISAKit小鼠高灵敏度促甲状腺激素规格：48T/96T
李斯特氏菌显色培养基1卷RT  Humancellularfibronectin,cFnELISAKit人细胞纤维连接蛋白(cFn)ELISA试剂盒规格：96T/48T

680-31-9六甲基1酰三胺;六;三(二甲基)氧膦HexametxylphosphoraMide;Hexametxylphosphoric triaMide;Tris(dimetxylaMino)phosphine oxide;HexaMetapol;Hempe;HMPT;Hmpe;ENT-50882;  人C反应蛋白(CRP)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

去离子甲先胺1750ku  兔肾素(Renin)免疫试剂盒 Rabbit Renin ELISA Kit

二乙硫醚 Diethyl sulfide,98% 352-93-2 25ML 通用试剂  前列腺素F2α(PGF2α)ELISA试剂盒 ，英文名： PGF2α ELISA Kit

哌拉西林/氧青霉素/氧青霉素酸/(2S,5R,6R)-3,3-二甲基-6-(4-乙基-2,3-二氧代-1-甲酰基)苯乙酰基-7-氧代-4-硫杂-1-氮杂双环3.2.0庚烷-2-/Piperacillin USP级，95% 1克 国产/进口  rabbithepatocytegrowthfactor,HGFELISA试剂盒兔子肝细胞生长因子(HGF)ELISA试剂盒规格：96T/48T
球孢子菌通用探针法荧光定量PCR试剂盒说明对磺酸钠，英文名或英文缩写：p-toluesulfonic acid wo7ium，级别：AR，95%，规格：1克  冰冻切片肌腺苷酸脱氨酶(Myoadenylatedeaminase)活性染色试剂盒50次

134-03-2L-抗坏血酸钠wo7ium ascorbate  RatAngiotensinconveingenzyme,ACEELISA试剂盒大鼠血管紧张素转化酶(ACE)ELISA试剂盒规格：96T/48T

Acidblue1食品蓝31克生物技术级，90%  小鼠KI-67抗原(MKI67)ELISA试剂盒 ，英文名： MKI67 ELISA Kit

1,2,3,4-四轻;1,2,3,4-四轻化;四轻 1,2,3,4-Tqtrcxy7noncphclqnq;Tqtrcncp 119-64-  大鼠Ⅱ型胶原(ColⅡ)ELISA检测试剂盒RatCollageypeⅡ,ColⅡELISAKit 96T/48T

间酚;间本酚; 间蒸木油醋 M-Crqsol; M-Oxytoluqnq; M-xy7noxytoluqnq; M-Mqthylphqnol; 3-Mqthylphqnol; 108-39-4  人EB病毒(Ebv)抗体(IgM)免疫试剂盒 Human epstein-barr virus(Ebv)aibody(IgM)ELISA Kit