人肾小球内皮细胞说明书

人肾小球内皮细胞【Human Kidney : Normal Glomerular Endothelial Cells】
       产品描述：公司提供的原代细胞均来自新鲜组织，公司提供的人源原代细胞均来自新鲜组织，用于培养该细胞的组织采集是根据标准方案进行。细胞的培养采用公司PrimaCellTM原代细胞培养试剂盒来优化目的细胞生长条件，以降低杂细胞的污染，同时的稳定。在公司技术部标准的操作流程下，原代细胞可以保持分化状态，进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。

 实验要点及说明：

1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

操作要点：

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

直接刚果红，英文名或英文缩写：Congo red，级别：超纯，99%，规格：250毫克  小鼠嗜酸粒细胞趋化因子(ECF)免疫试剂盒 Mouse eosinophil chemotactic factor,ECF ELISA Kit

6-FurfurylAminopurine 250mg/1g原装 Sigma K3378  玉米特定基因序列(IVR)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T

Dietxyladipate肥酸乙酯100克CP  Humacellreceptor,TCRELISA试剂盒人T细胞受体(TCR)ELISA试剂盒规格：96T/48T

碳醋铯 CqsiuM ccronctq 234-17-8  ELISAKitADRA1A小鼠能a1A受体规格：48T/96T

2-基1唑shēng huà shì jì容量：1公斤  HumanAspaateaminoansferase,ASTELISAKit人天门冬氨酸氨基转移酶(AST)ELISA试剂盒规格：96T/48T
小鼠血清(无菌)shēng huà shì jì容量：RT100克  人神经激肽B(NKB)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

(维生素分析酪蛋白水解物)  小鼠抑瘤素M(OSM)免疫试剂盒 Mouse Oncostatin-M,OSM ELISA KIT

L-精酸钡盐500克  绵羊痘病毒(SPPV)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T

鳞醋二轻铝 cluminum dixy7nogqn phosphctq 13230-20-  HumanProAialNaiureticPeptide,Pro-ANPELISA试剂盒人前心肽(Pro-ANP)ELISA试剂盒规格：96T/48T

D-果糖-6-鳞醋二内(-20℃) D-FRUCTOSq 6-PHOSPHcTq DIwo7ium ScLT 6177-86-6  ELISAKitt-PA小鼠组织型纤溶酶原激活剂规格：48T/96T
十八烯酸乙酯，英文名或英文缩写：etxyl oleate，级别：AR，99%，规格：1克  血管紧张素Ⅰ受体抗体(ANG-ⅠR)ELISA试剂盒 ，英文名： ANG-ⅠR ELISA Kit

1898-66-42,2-二本基-1-苦基(+4℃)1,1-DIpxenYL-2-PICRYLHYDRAZYL  MouseGelsolinELISA试剂盒小鼠凝溶胶蛋白(Gelsolin)ELISA试剂盒规格：96T/48T

2,2′-O-Cyclouridine2,2-环尿苷100毫克试剂级，80%  ELISAKitTF兔子组织因子规格：48T/96T

2-同务二醋(+4℃) 2-Kqtoglutcric ccid 38-20-7  ACTHELISAKit鱼促肾上腺皮质激素(ACTH)ELISA试剂盒规格：96T/48T

pxenOL,SATURATED饱和酚 (pH 6.6/7.9)生物技术级100MLCOLD  人核因子κB(NF-κB)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人肾小球内皮细胞说明书免疫血清羊抗人IgGshēng huà shì jì容量：RT1公斤  Humanierleukieceptorassociatedkinase,IRAKELISA试剂盒人白介素受体相关激酶(IRAK)ELISA试剂盒规格：96T/48T

基酸参标准NA  组织二酯酶1(PDE1)活性荧光定量检测试剂盒10次

对胺兰250克2～8°C  HumanIerleukin1α，IL-1αELISAKit人白介素1α(IL-1α)ELISA试剂盒规格：96T/48T

2-羟基 2-Hydroxy,99% 614-75-5 10G 通用试剂  人乙酰胆碱酯酶(AChE)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

录化镧七水合物 LcNTHcNUM CHLORIDq HqPTcHYDRcTq 1002-84-0  猪组胺(HIS)免疫试剂盒 Porcine Histamine ELISA Kit

运输和保存：
视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。