详细介绍
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产品描述:
细胞名称 杂交瘤细胞;CT-1G7说明书
形态特性淋巴母细胞样
生长特性半贴壁生长
特征特性该细胞属保藏,其特征特性尚未公开。
培养条件RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
传代方法1:3传代,3-4天传1次
传代情况C3
冻存条件基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测阴性
STR
同工酶
染色体
冷冻保存细胞之方法:
杂交瘤细胞;CT-1G7说明书冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)杂交瘤细胞;CT-1G7说明书准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
Fraser肉汤增菌液(FB)基础26080250g用于李斯特氏的选择性增菌培养(SN/T0-2005,ISO标准)。
MRS 肉汤 (CM0359) Oxoid incubation media MRS 肉汤 (CM0359) Oxoid
师岗链霉菌 支/瓶
SimmonsCitrateAgar
琼脂培养基L 250g 用于沙门氏菌的选择性分离培养
杂交瘤细胞;CT-1G7说明书*mALBELISAKit大鼠微量蛋白规格:48T
*AcSDKPELISAKit大鼠N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸规格:48T
*PA-IgG/M/AELISAKit大鼠抗血小板抗体IgG/M/A规格:48T
*NTX)ELISAKit大鼠Ⅰ型胶原N末端肽规格:48T
*HSP-27ELISAKit大鼠热休克蛋白27规格:48T
*大鼠Smad1ELISAKit大鼠Smad1规格:48T
*大鼠Smad7ELISAKit大鼠Smad7规格:48T
*26SPSMELISAKit大鼠26S蛋白酶体规格:48T
*TIEG1ELISAKit大鼠TGF-β诱导早期基因1规格:48T
*visfatinELISAKit大鼠内脂素/内脏脂肪素规格:48T
注意事项:
1.一般客户拿到杂交瘤细胞;CT-1G7说明书后,应该注意什么?
客户收到细胞先不开盖,放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞时的培养基拍一张照片,观察培养基的颜色和是否有漏液情况,显微镜下拍细胞100X,200X各一张),排除细胞本身污染的情况;收到细胞未开封,出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。
收到细胞时如无异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养液吸出,留下10ml培养液继续培养;超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。
细胞出现问题,不予以重发的情况有哪些?
(1)客户造成细胞污染,不重发;
(2)客户不正确操作致细胞状态不好,不重发;
(3)非推荐细胞培养体系致的细胞状态不好,不重发;
(4)细胞状态不好,未提供细胞培养前3天照片的,不重发;
(5)细胞培养时经其它处理的,不重发;
(6)细胞收到2天内,未告知,不重发;
(7)视具体情况而定。