鸟源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒说明

参数规格：

产品名称：鸟源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒说明
英文名称：
货号：EY-P7420

产品规格：50T
分类：荧光定量PCR试剂盒
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。
产品特点：
本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏 PCR检测试剂盒 。
荧光定量PCR试剂盒技术：
本实用新型技术公开了一种实时荧光定量PCR试剂盒，包括盒体，盒体由上盒体和下盒体组成，上盒体的底面上设有限位凸起，下盒体的顶面上设有与限位凸起匹配的凹槽，且在下盒体左右侧壁的下端均软连接有侧盖，侧盖远离下盒体的一端连接有卡勾，下盒体的上端边缘处设有环形凸起，两个卡勾分别勾住环形凸起的左右两端将上盒体固定在下盒体上；凹槽的内部设有固定杆，固定杆上通过转动件转动连接有用于放置试管的试管架；下盒体的左右两侧均设置有收纳槽。本实用新型技术通过将盒体分为上下组合的两个部分，并将两个部分通过侧盖连接，即可保证试剂盒的便携性，同时使用试剂盒自带的试管可提高检测的效率。

产品特点
1. 使用化学修饰的热启动聚合酶，反应特异性高，*程度地避免了非特异扩增；
2. 反应缓冲液经充分优化，反应灵敏快速，40个循环只需20多分钟；
3. 抗干扰能力强，反应重复性高，适合对土壤、粪便、肿瘤和血液来源的复杂样本中的靶基因进行检测分析。
在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，zui后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。
 特异性荧光标记：
 TaqMan法
 TaqMan探针的特性：
（1）5′端标记有报告基团（Reporter, R），如FAM、VIC等
（2）3′端标记有荧光淬灭基团 （Quencher, Q）
（3）探针完整，R所发射的荧光能量被Q基团吸收 ，无荧光， R与Q分开，发荧光
（4）Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性，可水解探针
相对定量通过内标定量：
内标（Endogenous Control）通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因，在细胞中的表达量或在基因组中的拷贝数恒定，受环境因素影响小，内标定量结果代表了样本中所含细胞或基因组数量。
相对定量分析方法  ：
 2-ΔΔCt
前提：目标序列和内参序列的扩增效率接近100％且偏差在5％以内
  1、用内参基因的CT值归一目标基因的CT值：
    ΔCT（test）= CT（target,test）-CT（ref,test） 
    ΔCT（calibrator）= CT（target,calibrator）-CT（ref, calibrator） 
  2、用校准样本的ΔCT值归一试验样本的ΔCT值：
         ΔΔCT= ΔCT（test） - ΔCT（calibrator）
  3、计算表达水平比率：
                    2 –ΔΔCT=表达量的比值

 

荧光定量PCR检测方法包括以下步骤：
(1)将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；
(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。
其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TA cloning载体，所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。
步骤(2)为：待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为肿瘤或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。

辛基本基聚氧醚，英文名或英文缩写：Triton x-100，级别：BR，规格：1克  HumanfactorB,BFELISAKit 人B因子(BF)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

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2-本酰安 2-Phqnylccqtcmidq 103-81-1  Humaninhibitorofapoptosis,IAPELISAKit人细胞凋亡抑制因子(IAP)ELISA试剂盒规格：96T/48T

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免疫血清羊抗人IgGshēng huà shì jì容量：RT1公斤  Humanierleukieceptorassociatedkinase,IRAKELISA试剂盒人白介素受体相关激酶(IRAK)ELISA试剂盒规格：96T/48T

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对胺兰250克2～8°C  HumanIerleukin1α，IL-1αELISAKit人白介素1α(IL-1α)ELISA试剂盒规格：96T/48T

2-羟基 2-Hydroxy,99% 614-75-5 10G 通用试剂  人乙酰胆碱酯酶(AChE)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

录化镧七水合物 LcNTHcNUM CHLORIDq HqPTcHYDRcTq 1002-84-0  猪组胺(HIS)免疫试剂盒 Porcine Histamine ELISA Kit
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(鱼精DNA)  英文名称MouseCCL1ELISAKit小鼠CCL1规格：96T/48T

低熔点琼脂糖shēng huà shì jì容量：2～8℃1克  冰冻切片组织细胞色素C氧化酶表达免疫荧光检测试剂盒10/20次

软骨速酶 (-20℃) CHONDROITINcSq cBC 904-13-9  ratEsadiolreceptor,ERELISA试剂盒大鼠雌二醇受体(ER)ELISA试剂盒规格：96T/48T

DL-苹果酸 DL-Malic acid (≥98%) 6915-15-7 25G 通用试剂  小鼠CD5抗原样蛋白(CD5L)ELISA试剂盒 ，英文名： CD5L ELISA Kit
鸟源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒说明TOLUIDInepLUEO胺蓝O高纯级灰色粉末RTsigma  小鼠血管内皮细胞生长因子C(VEGF-C)免疫试剂盒 Mouse Vascular Endothelial cell Growth Factor C,VEGF-C ELISA kit

10114-58-6俾士麦棕YBisMarck brown Y;Vesuvine;pxenylene brown;BisMark brown G;C.I. 21000  类鼻疽伯克霍尔德菌(PP)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T

DEAE葡聚糖凝胶A-25shēng huà shì jì容量：保存：-20℃5KU  HumaeninELISA试剂盒人肾素(Renin)ELISA试剂盒规格：96T/48T

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