人胃癌细胞；MKN-45图片

细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）人胃癌细胞；MKN-45图片准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
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产品描述：
细胞名称 人胃癌细胞；MKN-45图片
形态特性圆

生长特性贴壁生长

特征特性该细胞系由SAkiyama建立，源于一位35岁患有印戒细胞癌的女性的胃淋巴结。

培养条件RPMI1640(w/oHepes)20%FBS

传代方法建议初始浓度2.0×105cells/ml，1:3传代；4~5天１次。

传代情况C3

冻存条件基础培养基+5%DMSO+20%FBS

支原体检测培养法（-）

STRAmelogenin：X；CSF1PO：12；D13S317：8，11；D16S539：10；D18S51：16；D19S433：14，16.2；D21S11：31；D2S1338：OL；D3S1358：15，16；D5S818：10，11；D7S820：10，11；D8S1179：13，17；FGA：19，24；TH01：7；TPOX：8；vWA：19；

同工酶

染色体67~71

注意事项：
​1.一般客户拿到人胃癌细胞；MKN-45图片后，应该注意什么？
客户收到细胞先不开盖，放在培养箱静置若干小时后（看细胞密度而定）在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议受收细胞时的培养基拍一张照片，观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞100X，200X各一张），排除细胞本身污染的情况；收到细胞未开封，出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。
收到细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过80%汇合度时，将培养瓶中培养液吸出，留下10ml培养液继续培养；超过80%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。
细胞出现问题，不予以重发的情况有哪些？
（1）客户造成细胞污染，不重发；
（2）客户不正确操作致细胞状态不好，不重发；
（3）非推荐细胞培养体系致的细胞状态不好，不重发；
（4）细胞状态不好，未提供细胞培养前3天照片的，不重发；
（5）细胞培养时经其它处理的，不重发；
（6）细胞收到2天内，未告知，不重发；
（7）视具体情况而定。
sLR*人可溶性瘦素受体规格48T/96T

sPL-A2*人可溶性磷脂酶A2规格48T/96T

sRANKL*人可溶性核因子κB受体活化因子配基规格48T/96T

sFASL*人可溶性凋亡相关因子配体规格48T/96T

sFAS/Apo-1*人可溶性凋亡相关因子规格48T/96T

sp185/HER-2*人可溶性蛋白185规格48T/96T

B7-2/sCD86*人可溶性白细胞分化抗原86规格48T/96T

sCD40L*人可溶性白细胞分化抗原40配体规格48T/96T

sCD30L*人可溶性白细胞分化抗原30配体规格48T/96T

sCD28*人可溶性白细胞分化抗原28规格48T/96T
人胃癌细胞；MKN-45图片Tsg101抗原Tsg101(Tumorsusceptibilitygene101protein)Tsg101抗原0.5mgTsg101(Tumorsusceptibilitygene101protein

恶性肿瘤特异性生长因子抗原TSGF(TumorSpecificGrowthFanctor)恶性肿瘤特异性生长因子抗原0.5mgTSGF(TumorSpecificGrowthFanctor

TSHR(Thyroidstimulatinghormonereceptor)(NT)促甲状腺素受体（抗原）0.5mgTSHR(Thyroidstimulatinghormonereceptor

TSHR(Thyroidstimulatinghormonereceptor)(CT)促甲状腺素受体（抗原）0.5mgTSHR(Thyroidstimulatinghormonereceptor

促甲状腺素受体抗原TSHR(Thyroidstimulatinghormonereceptor)促甲状腺素受体抗原0.5mgTSHR(Thyroidstimulatinghormonereceptor

TSHR(Thyroidstimulatinghormonereceptor)促甲状腺素受体（抗原）0.5mgTSHR(Thyroidstimulatinghormonereceptor

肺癌肿瘤阻抑基因1抗原TSLC1(tumorsuppressorinlungcancer-1)肺癌肿瘤阻抑基因1抗原0.5mgTSLC1(tumorsuppressorinlungcancer-1

TSLP(Thymicstromallymphopoietinisoform1)淋巴细胞生成素-1（抗原）0.5mgTSLP(Thymicstromallymphopoietinisoform1
冷冻保存细胞之方法：
人胃癌细胞；MKN-45图片冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。