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狼疮抗凝抗体(LAC/LA)ELISA试剂盒技术分析说明

阅读:126发布时间:2015-12-30

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狼疮抗凝抗体(LAC/LA)ELISA试剂盒技术分析说明

狼疮抗凝抗体(LAC/LA)ELISA试剂盒试验原理:
BFGF试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知BFGF浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将BFGF和*标记的抗体同时温育。人碱性成纤维细胞生长因子ELISA 检测试剂盒洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中BFGF的浓度呈比例关系。

狼疮抗凝抗体(LAC/LA)ELISA试剂盒自备材料
1.蒸馏水。
2.加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
3.振荡器及磁力搅拌器等。

安全性A
1.避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
2.实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3.不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

狼疮抗凝抗体(LAC/LA)ELISA试剂盒操作注意事项
1.试剂应按标签储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
2.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
3.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
4.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
5.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
8.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9.按照中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

狼疮抗凝抗体(LAC/LA)ELISA试剂盒样品收集、处理及保存方法
1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2、血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3、细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4、保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

试剂的准备
标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。

2.洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。

狼疮抗凝抗体(LAC/LA)ELISA试剂盒操作步骤
1.使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
2.根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。
3.加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的*标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
4.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
5.每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
6.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
7.每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。
8.取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
9.在450nm波长处测定各孔的OD值。

局限
6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到的结果。

狼疮抗凝抗体(LAC/LA)ELISA试剂盒性能
1. 灵敏度:zui小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
2. 特异性:不与其它细胞因子反应。
3. 重复性:板内、板间变异系数均小于10%。

类肌腱蛋白c(TNC)ELISA试剂盒结果判断与分析
1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值

2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的BFGF标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的BFGF含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。

3、检测值范围:0-800pg/ml

4、敏感度: 1.0 pg/ml

DPT     人皮肤蛋白       规格:  48T/96T

 CTACK/CCL27      人皮肤T细胞虏获趋化因子       规格:  48T/96T

 FSA   人胚胎性硫糖蛋白抗原        规格:  48T/96T

 CIAP 人牛小肠碱性磷酸酶     规格:  48T/96T

 FⅫ     人*Ⅻ   规格:  48T/96T

 FⅩⅢ        人*ⅩⅢ      规格:  48T/96T

 FⅩ     人*Ⅹ   规格:  48T/96T

 FⅨ     人*Ⅸ   规格:  48T/96T

 Ⅷ-Ag        人*Ⅷ相关抗原        规格:  48T/96T

 FⅢ     人*Ⅲ   规格:  48T/96T

 FⅡ     人*Ⅱ   规格:  48T/96T

 F1+2 人*原片段F1+2   规格:  48T/96T

 T-TM 人*血栓调节蛋白复合物   规格:  48T/96T

 TR      人*受体   规格:  48T/96T

 TAT    人*抗*复合物    规格:  48T/96T

 Gelsolin    人凝溶胶蛋白   规格:  48T/96T

 CLU   人凝聚素    规格:  48T/96T

 gelson      人凝胶原蛋白   规格:  48T/96T

 UFC   人尿游离*      规格:  48T/96T

 ALB   人尿微量白蛋白      规格:  48T/96T

 UreC 人尿素酶相关蛋白C     规格:  48T/96T

 PLAUR/uPAR       人*型纤溶酶原激活物受体      规格:  48T/96T

 uPA/PLAU      人*型纤溶酶原激活物       规格:  48T/96T

 uPA/PLAU      人*型纤溶酶原激活物       规格:  48T/96T

 uPA    人*型纤溶酶原激活物       规格:  48T/96T

 UK      人*    规格:  48T/96T

 UP      人尿蛋白    规格:  48T/96T

 GDI    人鸟苷酸解离抑制因子        规格:  48T/96T

 GEF   人鸟苷酸交换因子 规格:  48T/96T

 ODC 人*脱羧酶      规格:  48T/96T

 ODC 人*脱羧酶      规格:  48T/96T

 OCT   人*氨基甲酰转移酶    规格:  48T/96T

 FAK   人黏着斑激酶   规格:  48T/96T

 MAdCAM-1     人黏膜地址素细胞黏附分子       规格:  48T/96T

 BDNF       人脑源性神经营养因子        规格:  48T/96T

 BNP   人脑钠素/脑钠尿肽        规格:  48T/96T

 NGB 人脑红蛋白       规格:  48T/96T

 ENK   人脑啡肽    规格:  48T/96T

 BGP/Gehrelin        人脑肠肽    规格:  48T/96T

 visfatin      人内脂素/内脏脂肪素    规格:  48T/96T

 vaspin       人内脏脂肪特异性*蛋白酶抑制剂        规格:  48T/96T

 EL      人内皮脂肪酶   规格:  48T/96T

 ES      人内皮抑素       规格:  48T/96T

 eNOS-3    人内皮型一氧化氮合成酶3        规格:  48T/96T

 eNOS       人内皮型一氧化氮合成酶    规格:  48T/96T

 ET-1   人内皮素1        规格:  48T/96T

 ET-1   人内皮素1        规格:  48T/96T

 EG-VEGF       人内分泌腺来源的血管内皮生长因子     规格:  48T/96T

 ET      人内毒素    规格:  48T/96T

 TdT    人末端脱氧核苷酸转移酶    规格:  48T/96T

 TCC C5b-9      人末端补体复合物C5b-9    规格:  48T/96T

 ponticulin        人膜桥蛋白       规格:  48T/96T

 ANX-Ⅴ     人膜联蛋白Ⅴ   规格:  48T/96T

 MAC 人膜攻击复合物      规格:  48T/96T

 MCP/CD46     人膜辅蛋白       规格:  48T/96T

 MIS/AMH        人缪勒管抑制物质/抗缪勒管激素     规格:  48T/96T

 IAP     人免疫抑制酸性蛋白     规格:  48T/96T

 IgHV *重链可变区    规格:  48T/96T

 IgH     *重链 规格:  48T/96T

 ILTsR/LIR/CD85   *样转录体受体       规格:  48T/96T

 λ-IgLC    *轻链lambda 规格:  48T/96T

 κ-IgLC    *轻链kappa抗体 规格:  48T/96T

 IgM    *M      规格:  48T/96T

 Ig-j      *j链   规格:  48T/96T

 IgG    *G      规格:  48T/96T

 Fcγ   *G Fc片段     规格:  48T/96T

 FcγRⅢ/CD16     *G Fc段受体Ⅲ    规格:  48T/96T

 FcγRⅡ/CD32     *G Fc段受体Ⅱ    规格:  48T/96T

 FcγRⅠ/CD64     *G Fc段受体Ⅰ    规格:  48T/96T

 IgE     *E      规格:  48T/96T

 FcεRⅡ/CD23     *E Fc段受体Ⅱ     规格:  48T/96T

 FcεRⅠ   *E Fc段受体Ⅰ     规格:  48T/96T

 IgA     *A      规格:  48T/96T

 FcαRⅠ/CD89     *A Fc段受体Ⅰ     规格:  48T/96T

 Irna    人免疫核糖核酸      规格:  48T/96T

 irGH   人免疫反应性生长激素        规格:  48T/96T

 PWM 人美洲商陆素   规格:  48T/96T

 CED-3      人美丽线虫凋亡基因     规格:  48T/96T

 ankyrin      人锚蛋白    规格:  48T/96T

 ATM   人毛细血管扩张性共济失调突变基因     规格:  48T/96T

 Gliadin-IgA     人麦角蛋白IgA       规格:  48T/96T

 MV IgM    人麻疹病毒IgM      规格:  48T/96T

 MV IgG    人麻疹病毒IgG      规格:  48T/96T

 MV     人麻疹病毒       规格:  48T/96T

 PF      人落叶型天疱疮抗体     规格:  48T/96T

 Helical Peptide      人螺旋肽    规格:  48T/96T

 RV Ag      人轮状病毒抗原      规格:  48T/96T

 OVA sIgG       人卵清蛋白特异性IgG        规格:  48T/96T

 OVA sIgE       人卵清蛋白特异性IgE 规格:  48T/96T

人卵巢癌标志物CA125ELISA Kit,48T/96T      人卵巢癌标志物CA125ELISA Kit,48T/96T      规格:       48T/96T

 PEA   人绿脓杆菌外毒素A     规格:  48T/96T

 TrxR   人硫氧还蛋白还原酶     规格:  48T/96T

 Trx      人硫氧化还原蛋白 规格:  48T/96T

 MS     人硫酸褪黑色素      规格:  48T/96T

 KS      人硫酸角质素   规格:  48T/96T

 HSPG       人硫酸肝素糖蛋白 规格:  48T/96T

 JE IgG      人流行性乙型脑炎抗体IgG       规格:  48T/96T

 EP      人流行性腮腺炎      规格:  48T/96T

 FLU   人流感病毒抗体IgG     规格:  48T/96T

 FLU A       人流感病毒A   规格:  48T/96T

 SCCAg     人鳞状细胞癌相关抗原        规格:  48T/96T

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 


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