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技术文章

细胞冻存的一般方法

阅读:175发布时间:2015-9-30

   elisa试剂盒 开始细胞冻存前,仔细检查细胞冻存所需的仪器和试剂是否齐全:一般主要有:传代细胞单层、适宜生长液、灭活小牛血清、*溶液、7.5%NaHC03溶液、0.25%*溶液、标签用具:100ml方瓶(培养细胞用)、克氏瓶、红翻帽塞、吸管(10ml、lml)、细胞冻存管、二甲基亚砜、CO2孵箱、超挣台、倒置显微镜、2~8℃冰箱、-20℃冰箱、液氮罐。

  elisa试剂盒   镜检细胞,挑选培养3~4天的细胞,生长状态良好,无污染、异常及可疑病变细胞。配制细胞培养液:根据不同的细胞需用不同的基础液,培养液配方为(基础液:7.5%*:1万单位*=100:1:0.25)。制备细胞悬液:挑选培养3—4天的细胞,细胞界限清晰,具有立体感,细胞形态良好的单层细胞瓶,弃去培养液,先用PBS洗液冲洗细胞表面1-2次,再向克氏瓶中加入0.25%*8ml,等细胞面开始出现裂缝时倒掉瓶中部分*,大克氏瓶中保留2 ml,放置几分钟使细胞*脱落到*中,收集含细胞的*,并用培养液冲洗细胞瓶3-4次,收集冲洗液;向收集液中补加以下物质:小牛血清使终浓度为20%、二甲基亚砜使终浓度为9%;分装:将细胞悬液混匀后,立即分装于细胞冻存管中,每管按1~1.6ml的量分装,拧紧管盖;在冻存管上做好标记,包括细胞代号及冻存日期等。
    先将冻存管放入普通冰箱冷藏室(2~8℃),约3-4h;接着将冻存管置于普通冰箱冷冻室,约3-4 h;然后将冻存管放置液氮灌口,过夜;zui后将冻存管投入液氮保存。记录:记录内容包括冻存日期、细胞代号、冻存管数、冻存过程中降温的情况、冻存位置以及操作人员。

DTYMK 脱氧胸苷酸激酶DTYMK抗体
DUSP10 双特异性蛋白磷酸酶10抗体
DUSP5 双特异性蛋白磷酸酶5抗体
phospho-Dynamin 1  磷酸化酶动力蛋白1抗体
  elisa试剂盒 Dynamin 1 酶动力蛋白1抗体
phospho-Dynamin 1  磷酸化酶动力蛋白1抗体
Dynorphin A 脑啡肽A抗体
DMWD 强直性肌营养不良相关蛋白9抗体
DYX1C1 DYX1C1蛋白抗体
DZIP3 E3泛素蛋白连接酶dzip3抗体
DDX23 三磷酸腺苷依赖解旋酶DDX23抗体
DPPA5 多能发育相关基因5抗体
DDX3 三磷酸腺苷依赖解旋酶DDX3抗体


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