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上海抚生实业有限公司
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阅读:608发布时间:2019-6-14
让细胞活跃的诀窍多长时间吗
让细胞活跃的诀窍多长时间吗?它们就人的心情一样,只要你好好保护它就会增加细胞细胞活跃。如果细胞心情不好,那么实验的结果也不会好到哪儿去。如何让细胞?
1. 确保所有实验室材料都无菌
交叉污染是细胞培养的大敌。即使是*轻微的污染,也可能毁了几个星期的成果。因培养箱内温暖潮湿,真菌极易生长,因此必须注意定期清洁。此外,在将培养瓶、移液管及其他的相关物品放入超净台之前,应用酒精擦拭干净,以避免污染。
2. 小心处理您的培养物
细胞培养的脆弱性怎么强调也不为过。剧烈摇晃,或连续的温度波动可能会对生长产生不利的影响。确保培养箱是水平的,温度均一,且远离电动仪器。此外,尽量避免一次处理多个细胞系,因为它可能会影响细胞的基因型和表型。您还应定期完成STR图谱分析,以确认细胞系的身份。
3. 在使用前正确解冻细胞
尽管解冻看起来是个简单的步骤,但必须操作得当,以免伤害细胞。长时间暴露在高温条件下会使细胞无法铺板。因此,冻存管应当在37°C水浴中放置2分钟,然后用条件培养基稀释,以避免DMSO造成直接伤害。
4. 使用对数生长期的细胞
细胞培养过程共有3个阶段:停滞期、对数期和平台期,分别代表了低细胞生长、高细胞生长和无细胞生长。*有活力的细胞是健康的,快速分裂的,在对数期以70-80%的汇合度存在。
5. 在传代之前不要让细胞*汇合
汇合度是指贴壁细胞占据培养瓶表面积的比例。*汇合意味着100%的表面都被贴壁细胞覆盖。一定要避免这种状态,因为它意味着细胞不能继续生长。不过,当务之急是使用活跃生长的细胞。
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